山羊传染性胸膜肺炎病原的分离及中国分离株的分子特征分析.pdfVIP

摘 要 山羊传染性胸膜肺炎(ContagiousCaprlne 养殖业的发展，被世界动物卫生组织(OIE)列为B类传染病。白上世纪末首次分离到CCPP病 e,Mccp)以来，已经有三十多个国家报道有此病发生，但是仅有十一个国家分离到CCPP的病原 体。 本实验取临床上疑似感染山羊传染性胸膜肺炎的山羊肺脏，作无菌处理后将匀浆液接种液体 培养基培养，当培养液颜色变黄时，涂固体平板培养，挑取单克隆菌落，再接种液体培养基。经 过三次克隆纯化后进行生化实验、电镜观察、PCR及酶切鉴定、克隆、测序等基因特征鉴定， 标准株Y-goat、Mb97代表株N29、绵羊肺炎支原体(Mycoplasma Y-98进行了遗传进化树分析。结果表明，该病原体在分子特征上属山羊支原体山羊肺炎亚种。 将生化实验、电镜观察、基因特征鉴定为山羊支原体山羊肺炎亚种的病原体扩大培养，取第 体变化与临床表现基本同步。剖杀后的病羊肺组织做显微病理检查，呈现典型的纤维素性胸膜肺 炎病变。并从病羊肺中再一次分离到该病病原体。结果表明，本研究分离到的支原体在分类地位 上归属于山羊支原体山羊肺炎亚种，人工感染试验进一步证明其为山羊传染性胸膜肺炎病原体。 C)，对PCR扩增产物进行酶切鉴定和序列测定，将结果与丝状支原体