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吸光光度分析.ppt
(1)物质对光的选择性吸收 (2)光吸收曲线 将不同波长的单色光通过某一固定浓度的有色溶液,测量对应波长下溶液对光的吸光度,然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,即可得一曲线,称为光吸收曲线。 光吸收程度最大处的波长称为最大吸收波长,用λmax表示。 三、朗伯-比耳定律 A = Kbc 其物理意义是:在一定温度下,一束平行的单色光通过均匀的非散射的溶液时,溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。 A = abc (c:g·L-1,b:cm,K用a表示,其单位为L·g-1·cm-1,a称为吸光系数 ) A =εbc (c:mol·L-1,b:cm,K用ε表示,其单位为L·mol-1·cm-1,ε称为摩尔吸光系数 ) ε越大,反应越灵敏,可测定组分的浓度也越低。一般认为ε<104的显色反应属低灵敏度,在104~5×104时属中等灵敏度, 在6×104~105时属高灵敏度, >105属超高灵敏度。 显色反应一般可表示为: M + R ? MR (被测组分) (显色剂) (有色化合物) 吸光光度仪器的一般操作程序 a.选合适的波长作为入射光,接通电源预热仪器。 b.调透光率为零,即仪器零点。光路应断开,光电转换元件不应受光,显示系统显示T%=0.0,如不在“0”处,则应调节到“0”。 c.调T%=100.0 。将参比溶液置于光路,接通光路(盖上吸收池暗箱盖),显示系统显示T%= 100.0 。2、3步应反复调整。 d.将样品溶液推入光路,读取吸光度A。溶液的吸光度应控制在0.2~0.8范围内,使测定结果有较高的准确度。而当A=0.434或T%=36.8时,测定的误差最小。过大或过小应予以调节。 e. 整理好仪器。 §10-4 吸光光度法的应用 2.工作曲线法(标准曲线法 )适用于经常性的、大批试样的分析 以A为纵坐标,标液的浓度c为横坐标作图,得到一条通过原点的直线,称为工作曲线或标准曲线。 再在相同条件下用相同方法配制样品溶液,并测出其吸光度Ax,在工作曲线上即可查得相应的浓度cx。 注意:待测样的测定结果应在工作曲线范围内,不能延长工作曲线;工作曲线也只能在同一次测定中应用。 无机及分析化学 * 本章主要介绍可见分光光度法的基本原理、仪器的基本结构和有关应用。 第十章 吸光光度分析法 1、熟悉吸光光度法的特点; 2、掌握吸光光度法的基本原理及适用范围; 3、了解吸光光度法的分析方法以及显色反应和显色条件的选择; 4、了解吸光光度法仪器构造及测量条件的选择。 学习要求 §10-1 吸光光度法的基本原理 二、物质对光的选择性吸收 三、朗伯—比耳定律 四、偏离朗伯—比耳定律的原因 §10-3 光度分析法及其仪器 一、目视比色法 二、分光光度法及分光光度计 一、显色反应与显色剂 二、影响显色反应的因素 §10-4 吸光光度法的应用 §10-2 显色反应及其影响因素 一、吸光光度法的特点 三、吸光度测量条件的选择 吸光光度分析:利用物质对光的选择性吸收特性进行测定一种分析方法,主要适用于微量组分分析。包括可见光吸光光度法、紫外吸光光度法、红外吸收光谱法。 紫外-可见光吸光光度法简称为吸光光度法。 §10-1 吸光光度法的基本原理 1.灵敏度高 测定含量可低至10-4~10-6% ; 2.准确度好 相对误差一般为2~5% ; 3.快速简便 步骤包括将样品处理成溶液、显色、测定,所需的仪器设备均不复杂,操作简便,易于掌握 ; 4.应用广泛 一、吸光光度法的特点 光的互补色示意图 二、物质对光的选择性吸收 1.单色光、复合光、互补色光 单色光:具有同一波长的光 复合光:由不同波长的光组成的光 互补色光:适当颜色的两种单色光按一定的强度比例混合,也可以成为白光,这两种单色光被称为互补色光 KMnO4溶液的光吸收曲线 2、溶液的颜色与光的选择性吸收 思考1、符合比耳定律的有色溶液稀释时,其最大吸收峰的波长位置 A.向长波方向移动 B.向短波方向移动 C.不移动,但高峰值降低 D.不移动,但高峰值增大 √ 当一束平行的单色光照射到任何均匀的、非散射的介质(固体、液体或气体),例如溶液时,光的一部分被介质吸收,一部分透过溶液,一部分被器皿的表面反射。如果入射光的强度为Io,吸收光的强度为Ia,透过光的强度为It,反射光的强度为Ir,则: Io = Ia + It + Ir 可简化为 :Io = Ia + It ( Ir 基本上不变 ) 透光率T 透光率倒数的对数则表示有色溶液对光的吸收程度,称为吸光度A
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