β3乙酰氨基葡萄糖基转移酶对白血病细胞分化的影响及调控机制.pdf

B3-乙酰氨幕葡萄糖皋转移酶对[Jm瘸细胞分化的影响及』e调拄机制 中义摘要 中文摘要 已有大量的文献报道：当细胞恶变或分化时，细胞糖复合物上的糖链结构常 发生变化，而这种变化来源于某些合成该糖链的相应的糖基转移酶表达的改变。 葡萄糖连接键，其qbl33GnT-2，．4，．8E型合成糖蛋白上Ⅳ．或O．连接型糖链中的多聚 乙酰氨基乳糖结构。本研究探讨这三种酶的表达和四株白血病细胞分化间的关系， 以及转录因子Ets．1对133GnT-2，．4，．8表达的调控。 本论文分为三个部分： 一、133GnT-2，．4，．8和人急性早幼粒白血病细胞株HL60及NB4分化的关系 目的：研究糖基转移酶133GnT-2，．4，．8表达变化和人急性早幼粒白血病细胞株 HL60及NB4分化的关系。 次，使用ATRA处理HL60和NB4两种人急性早幼粒白血病细胞株，使其向粒细胞方 向分化；或用TPA(PMA)．处理两种细胞株，使其向单核细胞方向分化。用实时 定量PCR(Real．time 株中的表达变化，并结合细胞形态学观察鉴定ATRA、TPA处理前后两个细胞株的 形态变化。 细胞中不表达，而在其它5株细胞中有不同程度的表达。在10。7mol／LATRA或 10ng／ml ．8的mRNA表达与不加分化诱导剂的对照组相比均见不同程度的升高。其中以 胞向单核细胞分化时明显：而HL60细胞的p3GnTs对两个分化诱导剂的上调作用较 NB4细胞更为敏感； 中义摘要 D3-乙酰氨基葡萄糖牿转移酶对(_lint瘸细胞分化的影响及』￡调控机制 结论：早幼粒白血病细胞HL60和NB4在ATRA或TPA诱导向不同方向分化时， 胞对分化诱导剂的敏感性强于NB4细胞。 二、[33GnT-2，．4，．8和人单核白血病细胞株SHI-1及THP．1分化的关系 目的：研究糖基转移酶133GnT-2，一4，．8表达变化和人单核白血病细胞株SHI．1 及THP．1分化的关系。 方法：在第一部分研究的基础上，改用人单核白血病细胞株SHI．1及THP．1为 研究对象，用实时定量PCR(Real-time ATRA、TPA处理前后两个细胞株中的表达变化，并结合细胞形态学观察鉴定。 但3天后回复；而10ng／ml 133GnT-2，-4，．8的表达未见明显改变。与细胞形态学变化一致。 结论：人单核白血病细胞株对ATRA及TPA的反应均不如人急性早幼粒白血病 所用浓度的ATRA及TPA都没有反应，与细胞形态学不改变相一致。 三、转录因子Ets．1对133GnT-2，．4，．8表达的调控研究 目的：探讨白血病细胞诱导分化过程中Ets．1的表达及其对糖基转移酶对 133GnT-2，-4，．8的转录调控。 ’ 方法：采用Real，time 基因DNA的结合以及Ets．1对133GriT的转录调控。 结果：在ATRA或TPA诱导分化下，HL60细胞qbEts．1mRNA的表达均有不同 或TPA作用后，总体上，Ets．1的表达都是下降的。THP．1细胞Ets．1的表达基本不变。 的133GnT II 83-乙酰氨摹葡萄糖幕转移酶对臼仇病细胞分化的影响及其调控机制 中文摘要 和D3GnT-8基因DNA片段，但未能检测到Ets-1对133GnT-41拘表达调控。 Ets．1的调节。 关键词：D3一乙酰氨基葡萄糖转移酶；白血病细胞分化；Ets—l 作 者：仇灏 指导教师：吴士良 周迎会 III theEffectandMechanism Leukemia