TGFβ1对新生鼠肺成纤维细胞增殖周期的影响及机制研究.pdfVIP

一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………·1 ’ 英文论著摘要……………………………………………………………………·8 二、英文缩略语………………………………………………………………………16 三、论文 亩f言………………………………………………………………………………………………………“11／ 刚舌………………………………………………………………………………………………………“l 材料与方法………………………………………………………………………18 结果………………………………………………………………………………．．29 讨论………………………………………………………………………………………………………．．44 结论………………………………………………………………………………………………………．．47 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………48 五、参考文献…………………………………………………………………………·49 六、附录 综述…………………………………………o…………………………………………………………¨52 在学期间科研成绩………………………………………………………………62 致谢………………………………………………………………………………63 个人简介…………………………………………………………………………64 ·中文论著摘要· TGF．p1对新生鼠肺成纤维细胞增殖周期的影响 及其机制的研究 刖 置 慢性肺疾病(chronicdisease，CLD)是患有心肺疾病的新生儿，特别是 lung 早产儿，因长时间吸入高浓度氧或机械通气治疗而导致的一种严重的并发症。近 年来，新生儿和早产儿管理技术的不断提高，使得低出生体重儿的存活率不断增 加，CLD的发病率也呈上升趋势。据报道，出生体重小于750克的病人发生率大 1251--1500克的发生率为7％【l】。其中，重者生后一年内死于呼吸衰竭，存活者也 需长期(数月或数年)依赖氧气或机械通气治疗。CLD的最终结局为不可逆的肺 间质纤维化，使患儿肺功能受损，最终严重影响了其生存质量。目前，CLD的发 病机制尚不清楚，且仍无理想的防治措施，故探索CLD肺纤维化的发生机制成为 当今新生儿领域亟待解决的问题。 现研究认为，CLD肺纤维化的发病机理为肺成纤维细胞异常增殖，造成细胞 外基质(ECM)合成及降解失衡，而对其发生机制的研究多集中于细胞因子水平。 在众多的细胞因子中，因为转化生长因子-p1(transforminggrowthfactor，TGF-131) 与纤维化的关系比较明确，所以其发生作用的机制成为研究的热点。 目前有研究发现，调节细胞增殖的最终环节发生在细胞周期水平上。正常细 胞周期包括Gl、S、G2和M四个时相。期间存在多个调控点调节各时相间的转 换，其中较为关键的是G1_S和G2_M这两个调控点，尤以G1-÷S最为重要。 其通过接受细胞周期蛋白构成的网络调节系统作用，发挥细胞周期调控功能。在 肾纤维化及肝纤维化领域，均有TGF．[31通过调节相应细胞的细胞周期调控分子 kinases2，CDK2) 报道。其中，因为细胞周期蛋白依赖性激酶一2(Cyclin．dependent kinaseinhibitor27， 及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子·27(Cyclin—dependent P27)发挥重要的调控功能而研究较多。那么，在高氧致新生儿CLD肺纤维化发 生中，CDK2及P27的作用如何呢?因此，本研究基于我们前期的研究结果，通 过应用免疫组化、Real．TimePCR等技术，试图阐明高氧致新生鼠CLD模型中 响作用，以期为寻找新的防治途径奠定实验基础。 材料与方法 一、动物实验 (一)实验分组及动物模型的制备 将自然分娩的新生鼠，随机分为两组，即实验组(高氧组)和对照组(空气 组)，每组均为32只。实验组将新生鼠(连同母鼠)生后立即置于氧箱中，持