激活蛋白1和甲减大鼠肾脏损伤的相关性的研究.pdf

中文摘要 激活蛋白一1与甲减大鼠肾脏损伤的相关性研究 摘 要 目的：甲状腺功能减退(以下简称甲减)可造成一系列 靶组织及靶器官的损害，其对于肾脏结构和功能的损害已被 大量临床及动物试验所证实。为研究甲减肾损伤的可能发病 机制，本实验观察：制备不同水平的甲减动物模型，通过对 大鼠甲状腺功能的测定确定模型复制成功；应用免疫组织化 学方法检测激活蛋白．1(activator c．Jun、转化生长因子．B factor-Bl， 1(transforminggrowth TGF．B 1)在甲减大鼠肾脏中的表达，并对其进行半定量分 平。初步研究甲减大鼠肾脏组织中AP．1、TGF．B1与肾脏损 伤的关系，探讨AP．1在甲减肾损伤发病中的作用及机制， 为l临床预防和治疗甲减肾损伤提供理论依据。 系统分析了不同甲减水平大鼠肾脏组织中c．Jun及TGF．p1 的表达差异，并分析两基因与肾脏损伤之间的关系。本研究 共分五部分： 1实验性大鼠分组及动物模型的制备：选择4．5周龄(70 —100 g)Wistar大鼠，随机分为轻度甲减组(gentle group，GHG)、重度甲减组(densehypothyroidgroup，DHG) 中文摘要 条件饲养11周，雌雄各半。饲料实测含碘量为50 I，tg／kg，天 津自来水实测含碘量8岭／L，每升饮水中加入KI量：DHG： 0 g， 进水30ml来估计每日总碘摄入量。 2血清学测定：分别留取三组动物的不抗凝全血4ml， 离心，吸取血清约2ml，利用化学发光免疫分析方法测定血 清TT3、TT4、FT3、FT4的水平。 3甲减大鼠肾脏形态学改变：以模型为基础，对三组大 鼠肾脏组织切片，HE染色，在光镜下观察其形态学变化。 4免疫组化：对三组大鼠肾脏切片，进行免疫组化染色。 在各组大鼠肾脏组织的表达，分析不同甲状腺激素降低水平 伤的关系。 5甲减大鼠肾脏c．Jun的基因表达：取．80℃保存的新鲜 灰度测量，结果取目的基因与内参照的比值进行半定量分 析。 结果：1重度甲减组与正常对照组相比TT3、TT4、FT3、 FT3稍有降低(尸O．05)，无显著性意义。 中文摘要 2在光镜下观察HE染色切片，与正常对照组相比，轻 度甲减组肾小球、肾小管基底膜增厚，肾小球系膜基质增多、 系膜区扩大，肾小球面积减小。重度甲减组比轻度甲减组变 化更加明显。 3正常对照组肾组织可少量表达c．Jun，肾小球内的表达 高于’肾小管。c．Jun在‘肾小球中的表达：重度甲减组与正常对 照组相比显著增高(尸O．01)；重度甲减组与轻度甲减组相 比显著增高(氏O．01)：轻度甲减组与正常对照组相比无显 正常对照组相比显著增高(氏0．01)；重度甲减组与轻度甲 减组相比显著增高(PO．05)；轻度甲减组与正常对照组相 比无显著差异(尸O．05)。 正常对照组肾组织中可见TGF．[31的少量表达，在肾小 球及肾小管中的表达无明显差异。TGF．131在肾小球中的表 达：重度甲减组与正常对照组相比显著增高(PO．01)；重 度甲减组与轻度甲减组相比显著增高(尸O．01)；轻度甲减 中的表达：重度甲减组与正常对照组相比显著增高 (P0．01)；重度甲减组与轻度甲减组相比显著增高 (P0．05)；轻度甲减组与正常对照组相比显著增高 (尸O．05)。 4重度甲减组与正常对照组相比，肾脏组织中的c．Jun 基因表达水平明显上升(尸O．01)。重度甲减组与轻度甲减 组相比，肾脏组织中的c-Jun基因表达水平明显上升 (尸O．01)。轻度甲减组与正常对照组相比，肾脏组织中的 中文摘要 上相似的结果进一