一株新城疫病毒分离株生物学特性的初步的研究.pdfVIP

吴扬：一株新城疫病毒分离株生物学特性的初步研究 ! 一株新城疫病毒分离株生物学特性的初步研究 研究生：吴扬 导师：朱国强 陈义平 摘 要 新城疫(NewcastleDim鹤e)是由新城疫病毒引起的禽类的一种高度接触性、 烈性传染病，是威胁世界养禽业的主要疾病之一，被世界动物卫生组织(0m)列 属于副粘病毒科。禽腮腺炎病毒属，基因组为单殷负链RNA病毒，长度约为15kb， 磷酸化蛋白P，基质蛋白M，融合蛋白F，血凝素～神经氨酸酶蛋白HN，大分子 蛋白L)。尽管新城疫病毒只有一个血清型，毒株之间在毒力和致病性方面存在差 异。所有的新城疫病毒根据其致病性差异可分为3种，即强毒、中等毒力和低毒 力毒株。自从薪城疫于1946年首次在中国证实流行至今，其已经流行了几十年。 在80年代以后，中国对于新城疫的防控非常重视，采取了普遍免疫的方法，但目 前免疫失败的现象仍然存在。 本研究从2006年国内某发病鸡场分离到一株新城疫病毒。通过对发病初期采 集的部分血清进行抗体检测，新城疫的HI抗体水平参差不齐，最高为210，最低 为24，离散度很大。将采集的部分死亡鸡的瘸料研磨后取上清接种5枚10日龄SPF 鸡胚进行病毒分离，结果成功分离到一株具有血凝活性的病毒，其初代分离毒的 HA效价为28。经过Ⅲ试验鉴定，其可被ND标准阳性血清所抑制，不能被禽流 感(H9与H5亚型)标准阳性血清所抑制，从而证实所分离到的病毒为新城疫病毒， 命名为NDV06．025。 强毒株。运用RT-PCR扩增了该分离株F基因的重要功能片段，并进行了序列测定。 序列分析表明所扩增目的片段的长度为535bp，与预期扩增片段相符。该分离株在 通过构建NDV的F基因遗传进化树，发现该分离株在分类地位上属于基因Vlld型， ! 吴扬：一株新城疫病毒分离株生物学特性的初步研究 与同期我国普遍流行的基因Ⅶ型NDV在遗传进化上极为相似，表明它们可能具有 共同的来源。 按照常规方法用新城疫La 分离毒NDV06—025的免疫保护效果进行测定。将30只28R龄的SPF鸡随机分为h、 B、C三个组，A、B两组分别用La 为不免疫对照组。三组免疫鸡分别在三个隔离器中饲养。免疫21天后三组均通过 鸡群发病情况，并检测血清抗体水平变化。攻毒后6日内所有的对照组均死亡， 而疫苗免疫组则完全保护。结果表明，目前使用的商品化LaSota灭活疫苗对于目 前流行优势毒株基因Ⅶ型新城疫病毒能够提供有效保护。 关键词：新城疫；新城疫病毒；血凝；血凝抑制；基因型；遗传进化树；疫苗 吴扬：一株新城疫病毒分离株生物学特性的初步研究 三 Studieson characterizationofonestrainof biological from in NewcastlediseasevirusisolatedChina2006 M，S．Candidate：Wu Yang Zhu Advisor：Prof．Guoqiang Chen Prof．Yiping Newcastledisease of diseases themost of qD)，one important poultry,causedby Newcastl