p38NFκBIL6在运动介导大鼠骨骼肌生物发生的作用.pdf

中文捅曼 肌肉发生是肌肉可塑性和肌肉发育的重要的生物学基础。狭义的肌肉发生最 初是指在胚胎发育过程中，体节细胞经过一些列增殖、迁移、分化，最终形成肌 肉组织的过程，广义的肌肉发生还包括了成体肌纤维的发生的内容，包括了成体 干细胞(主要指卫星细胞)成长为成熟肌细胞、肌纤维核上调某些肌肉特异性结 构、功能蛋白表达等过程。医学、农学、体育学的多方面研究都涉及到肌肉发生， 如肌肉创伤、老年退行性少肌症和肌营养不良症的治疗、畜禽养殖、运动介导的 肌肉适应性变化等。肌肉发生涉及了一系列复杂的分子事件，对细胞外信号系统 如GH／IGF一1通路等已经有深入的研究，但是细胞内分子事件迄今为止我们仍对 此知之甚少。p38／NF．KB／IL．6是近年来发现的肌肉发生的细胞内信号通路，自此 发现以来就受到广泛的关注。运动条件下该通路的研究国内外未见报道，且肌肉 发生也是体育研究中最重要的领域，因此本研究以此通路为主干进行研究，对其 在运动中的动力学特征进行检测，并对其作用进行分析。 具体来说，本研究的目的为： KB、IL．6和 1、探索急性大、中强度运动后，肌肉发生通路因子p38、NF 肌肉发生因子及辅助因子M_RFs、MEF2c的相位变化，肌肉发生组织学微观指标 卫星细胞数量和形态的变化及肌肉损伤组织学标志肌丝和Z线排列的变化。探 KB、IL．6在生物发生的作用、三者之间的信号联 讨上述运动方案中，p38、NF 系、不同运动强度肌肉发生效果和机制的差异。 K K B／IL．6进行逐级阻断，检测急性大强度运动后的NFB蛋白总 2、p38／NF mRNA、卫星 量、磷酸化水平、IL．6mR．NA及肌肉发指标—郴Fs和MEF2c K 细胞数量和形态、损伤的组织学微观结构肌丝和Z线排列的变化。对p38／NF B／IL一6的通路存在及各因子作用进一步确认。 B蛋白水平、 3、检测2周大强度运动后，p38蛋白水平、磷酸化水平、NFK 磷酸化水平、IL．6mRNA及肌肉发生生化指标——MI疆s和MEF2cmRNA、肌 肉发生的组织学微观结构指标——卫星细胞数量和形态、肌肉发生宏观指标—— 腓肠肌和体重、损伤的组织学微观结构肌丝和Z线排列的变化，探讨长期运动 KB、IL．6在肌肉生物发生的作用、三者之间的信号联系、比较与急 后p38、NF 性运动的异同。 本研究分为三部分，研究方法与结论如下。 一、急性大、中强度运动对大鼠骨骼肌生物发生的影响 方法：1、选用雄性SD大鼠66只，按体重分层后，每组6只，分为11组 (尽量减小组间的体重的差异)：对照组(C1组)、急性大强度运动即刻组(H—Oh 运动即刻组(M．0h组)、急性中等运动后1h组(M—lh组)、急性中等运动后6h 24h组(M．24组)。所有运动组适应性训练后，休息两天，开始一次lh的大强度 或中等强度的运动。运动后取腓肠肌肌肉，检测p38蛋白总量、磷酸化水平(方 K 法：WESTERNBLOTTING)、NF mRNA B蛋白总量、磷酸化水平(ELISA)、IL．6 mRNA(方法：I汛PCR)、肌肉发生的 及肌肉发生生化指标一MRFs和MEF2c 组织学微观结构指标——卫星细胞数量和形态、损伤的组织学微观结构肌丝和Z 线排列的变化(方法：透射电镜)。