YWHAZ和VDAC1基因在甲状旁腺腺瘤中的表达及其临床相关性的研究.pdfVIP

目录 缩略语表……………………………………………………．．2 中文摘要……………………………………………………．．3 英文摘要……………………………………………………．．5 前言………………………………………………………．．7 第一部分RNAlater在甲状旁腺腺瘤组织保存中作用的评估………………．9 前—言……………………………………………………．．9HU舌……………………………………………………．．譬 材料与方法………………………………………………．．10 结果……………………………………………………．14 讨论……………………………………………………．20 结论……………………………………………………．22 第二部分YWHAZ基因在甲状旁腺腺瘤中的表达及临床相关性分析…………．23 前言…………………………………………．．．………．23日U舌…………………………………………．．．………．Z3 材料与方法………………………………………………．．24 结果…………………………………………．．…．……．31 讨论……………………………………………………．41 结j沧……………………………………………………．46 第三部分VDACI基因在甲状旁腺腺瘤中的表达及临床相关性分析…………．47 前言……………………………………………………．417日U舌……………………………………………………．， 材料与方法………………………………………………．．47 结果……………………………………………………．47 讨论…………………………………………．．………．．54 结论……………………………………………………．57 参考文献……………………………………………………．57 综述………………………………………………………59 致谢………………………………………………………72 缩略语表 ．2一 中文摘要 研究背景 原发性甲状旁腺功能亢进症，临床表现为高钙血症、低磷血症、骨骼病变以及 泌尿系统结石等症状。该病的致病因素存在较大异质性，随着分子生物学技术的不 断进展，不断涌现出许多针对其肿瘤标记物的研究。2011年Giusti等人通过蛋白质 组学技术筛选出YWHAZ和VDACl基因在甲状旁腺腺瘤中过量表达。故本实验在 上述研究的基础上，希望进一步探求YWHAZ和VDACl基因在我国甲状旁腺腺瘤 中的表达情况，并分析其与患者临床表现之间的关系，为甲状旁腺肿瘤的早发现、 早诊断以及开辟新的治疗靶点提供一定的帮助。 RNAIater可以稳定保护RNA的完整性，确保下游分析得到的数据真实地反应 样品信息。本实验通过比较液氮速冻法和RNAIater保存法的两组标本RNA的表达情 况，来探讨RNAIater在长期保存甲状旁腺组织中发挥的作用，为组织标本库的规范 化建设提供一定的理论基础。 研究目的 1．评价不同保存方式对于甲状旁腺腺瘤标本的影响。 表达与患者临床表型之间的关系。 研究方法 其余11例为术后即刻液氮封存，并转移至-80。C保存。比较两组标本RNA保存 情况的差异。 2．收集28例散发性甲状旁腺腺瘤的组织标本及临床资料，提取细胞总RNA和总蛋 白，使用Re,Time．PCR和Wester Blot等方法，检测甲状旁腺腺瘤细胞中YWHAZ 和VDACl基因的RNA及蛋白表达水平，并进一步分析其与患者临床表型的关系。 实验结果 (P0．01)。 2．28例甲状旁腺腺瘤的最大直径与患者术前总血钙、血磷、血ALP、血PTH和骨 痛症状等因素显著相关(P(0．05)。 3．YWHAZ基因高表达组患者与低表达组相比，术前游离钙、总血钙水平高，血 磷水平低，同时骨质破坏表现也更为严重(P(0．05)。 4．VDACl基因在28例甲状旁腺腺瘤中表达水平较低，且与患者生化指标无明显 的相关性。 实验结论 1．RNAlater与速冻方法相比，对于保存甲状旁腺腺瘤组织RNA具有一定优势。 2．在全国多中心研究中，RNAlater在标本转运和保存过程中体现出较大优势。 3．甲状旁腺腺瘤大小与患者临床症状的严重程度呈正相关。 4．YWHAZ基因