鼻咽癌中miR-155功能的初探.pdf

JPIll!I!!11f1111I舢ff|f『Ⅲ 2 1 硕士研究生：张余琴 硕士生导师：姚开泰教授 指导教师：肖 东研究员 摘 要 非编码小RNA分子，大约由21--25个核苷酸组成，其本身不具有开放阅读框架 (OI心)及蛋白质编码基因，有独特的特征序列，主要在转录后水平调控基因的 lin-4； 表达。Lee等在研究线虫C．elegans遗传发育筛选中首次发现miRNA Reinhart等发现第二个非编码miRNAlet一7。miRNAs在生物体的物质代谢、细胞 周期、细胞分化、凋亡、个体形态的形成和发育等一系列重要生命活动的调控 过程中扮演着重要角色。迄今，已发现多个发挥原癌基因或抑瘤基因作用的 及miR-26a等，它们通过调控下游靶基因的转录和翻译参与肿瘤的演进过程。研 associated 究表明，50％以上的miRNAs定位在肿瘤相关的基因组区域(cancer genomicregions，CAGR)，包括LOH区、染色体扩增区及脆性位点等，其表达水 平在许多肿瘤中发生改变，可能起到原癌基因或肿瘤抑制基因的作用，因此也 将此类miRNA称作oncomirs，在肿瘤发生、发展及转移等过程中发挥重要作用。 miR．155位于人类2l号染色体上，B．cell integrationcluster(Bic)基因的第三 个外显子内，此基因不含开放阅读框，过表达可促进细胞异常增殖；miR-155表 免疫反应和炎症反应中发挥效应；miR-155在许多常见肿瘤(如淋巴瘤、白血病、 摘要 乳腺癌、肺癌、结肠癌、甲状腺癌、宫颈癌、胰腺癌等)中表达上调。一些研究 显示，miR．155与肿瘤发生、转移或预后等相关，被认为是癌性微dRNA 腺癌细胞的抗凋亡能力和化疗耐药性。 Carcinoma，NPC)是指发生于鼻咽粘膜的恶性肿 鼻咽癌(Nasopharyngeal 瘤。发病年龄大多为中年人，亦有青少年患病者。中国的广东、广西、福建、 湖南等地为高发区。NPC恶性程度较高，早期即可出现颈部淋巴结转移。研究表 明，环境因素矛I]EB病毒(Epstein．Barrvirus，EBV)感染在致癌过程中均可能起十 分重要的作用：最近，Sengupta等利用高度精确和敏感的基因表达谱发现了8个 在激光捕获显微切害-IJ(1aser-capture 咽部上皮组织中具有显著性表达差异的miRNA，即表达下调的miR一29c、 miR-192。此外，他们还通过生物信息学预测和实验验证，确定了miR一29c的靶 matrix 基因为编码细胞外基质蛋I兰t(extraceilularproteins)，包括多种胶原蛋白 (collagens)和laminin 达上调，那么miR．155是否与NPC发生发展及转移等相关，目前尚未见报道。因 为NPC一个oncomir等一系列问题都值得我们深入探讨。 基于miR．155研究现状及其在明确NPC癌变早期的分子机制中的潜在意义， 本课题的研究目的为：明确miR．155在NPC细胞株和组织中的表达谱及其对NPC 细胞生物学行为的影响，包括增殖、迁移和EMT等。我们通过上调和下调miR-155 的表达水平明确其对NPC细胞生物学行为的影响，随后进行下游靶基因的筛选和 验证，初步探讨miR一155在NPC如上生物学行为中所扮演的角色及其机制，这将 为深入理解NPC发病的分子机制和寻找新的分