5-Fu诱导气管上皮细胞及其肺腺癌细胞重编程过程中组蛋白修饰及其染色质重塑研究.pdfVIP

11111111111111UlIIl U III 目 录 Y2297410 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………………6 二、英文缩略语……………………………………………………………………14 三、论文 论文一 前言……………………………………………………………………………15日U舌……………………………………………………………………………l， 材料与方法……………………………………………………………………15 实验结果………………………………………………………………………16 讨论……………………………………………………………………………22 结论……………………………………………………………………………23 论文二 前言……………………………………………………………………………24日U舌……………………………………………………………………………Z4 材料与方法……………………………………………………………………25 实验结果………………………………………………………………………26 讨论……………………………………………………………………………32 结论……………………………………………………………………………34 四、本研究创新性的自我评价……………………………………………………35 五、参考文献………………………………………………………………………36 六、附录 综述……………………………………………………………………………41 在学期间科研成绩……………………………………………………………59 致谢……………………………………………………………………………60 个人简介………………………………………………………………………61 ·中文论著摘要· 5-Fu诱导大鼠气管上皮细胞及肺腺癌细胞重编程中组 蛋白修饰及染色质重塑的研究 刖 吾 气管上皮在正常情况下更新缓慢，但在损伤修复时能再生以维持其完整性， 这种修复能力证明气管上皮中存在干细胞，只有在损伤的过程中才能激活其潜能。 前期研究发现，正常气管上皮细胞不表达胚胎干细胞相关基因Oct3／4、Sox2、 Nanog，而在5．Fu作用后，气管上皮基底膜上仅残留少量的细胞，这些细胞Oct3／4、 Sox2、Nanog出现阳性表达，而且阳性细胞一度增生，当出现纤毛细胞、粘液细 胞、基底细胞分化后，这些胚胎干细胞标记物的表达逐渐下调消失。5．Fu诱发气 饰、染色质重塑方面解析上述现象的分子调控机制。 依据肿瘤干细胞理论推断，肺癌可能是一种干细胞疾病：具有自我更新和无 限增殖能力的肺癌干细胞是肺癌发生的根源；肺癌的复发、侵袭转移、耐药、抗 辐射等恶性表型特征都与肺癌干细胞有关。现行抗癌药物几乎都是针对增殖期癌 细胞，对静止期癌干细胞有耐药性，因此阐明癌干细胞的生物学特征，实现对细 胞调控技术开发，尤为重要。 有关肺癌干细胞尚有争论，有人认为肺癌干细胞属于CDl33+细胞，但最近 CDl33．细胞，二者均具备相似的自我更新、侵袭及耐受化疗药物能力。最近从肺 力和无限增殖潜能，体内外放化疗实验均表明，LC．CDl33+对放化疗抵御能力与 Oct3／4基因表达有关，Oct3／4是参与调控胚胎干细胞自我更新和维持其全能性的 最为重要的转录因子之一，同时也是体外建立诱导多功能干细胞的关键基因。前 癌干细胞的组蛋白修饰染色质重塑尚无报告。我们用5．Fu作用肺癌细胞引起 Oct3／4阳性的肺癌细胞增加，通过荧光免疫双染等方法，比较此种细胞与普通肺 癌细胞不同，本文从组蛋白修饰、染色质重塑方面解析上述现象的分子调控机制。 材料和方法 一、离体大鼠气管损伤修复模型及肺腺癌0ct3／4[113性细胞的制备 取约200克左右的Wistar大鼠，雌雄不限，水合氯醛麻醉，无菌条件下取气管， 定，留做石蜡切片，灌入蛋白酶IV(o．5mg／m1)，结扎另一端4C消化过夜，收集消 0、3、6、12、24