外燥小鼠模型的建立和评价.pdf

f JlllIllrlIJIIlIIll lllIIi 111III Y1 目 录 中文摘要………．．．．．…．．．．………………………．I I 缩略词表．j…………．………………．．…………XI 前言……………．．．．．……………．………．．…．．1 第一部分理论研究……………………………．．…．．2 一、中医动物模型的研究方法探讨…………．．………．．2 二、中医证候动物模型的研究方法探讨…………………4 三、外燥小鼠模型的研究方法探讨…………．…………8 (一)外燥小鼠模型造模因素的选择…………………．8 0 (二)外燥小鼠模型的评价方法……………………．1 第二部分实验研究………………………．．…．．．．．．．19 一、外燥小鼠模型肺组织结构的变化…………………．19 二、外燥小鼠模型肺气卫外功能的变化………………．．21 (一)外燥小鼠模型支气管肺泡灌洗液中IgA含量的变化…21 (二)外燥小鼠模型支气管肺泡灌洗液中IgG含量的变化．．．24 7 (三)外燥小鼠模型支气管肺泡灌洗液中SP-A含量的变化．．2 三、外燥小鼠模型肺津输布的变化…．……．．．．．．…．…．30 (一)外燥小鼠模型气道Muc5acmRNA及其蛋白表达的变化．30 (二)外燥小鼠模型气道AQP5mRNA及其蛋白表达的变化…35 第三部分讨论．…．．．…．．………．．…．．．．…．．．．．…41 一、外燥对小鼠模型的影响……．．．…………．．．……41 (一)外燥对小鼠模型肺气卫外功能的影响……………41 (二)外燥对小鼠模型肺津输布的影响…………．…．．。．42 二、外燥小鼠模型的评价…………………．………．46 第四部分结 论………………．．．…………．…．…49 参考文献……．．．．．．…………．……………．……．50 附录……………………．．．………………．．…65 一、外燥小鼠模型肺组织结构的变化(HE染色)………．．．65 二、气道MUCSACMRNA实时荧光定量PCR…………．．……67 三、气道MucSAc蛋白的表达(免疫组化)………………68 0 四、气道AQP5MRNA实时荧光定量PCR……………．．…．．7 五、文献综述．………．……………………．……71 8 致谢………．．．．…………．……………………7 药开发的一个重要途径。 燥，为自然界六气之一，是秋之主气。“岁金太过”或“岁木不及”， 则燥气可化为致病因素，称为燥邪，因其来源于外，故常称为外燥。外燥 是中医病因学说的重要组成部分，但对外燥理论与实验的研究均较少。本 课题在前期研究的基础之上，拟通过总结中医动物模型以及中医证候动物 模型的研究方法，结合外燥的病机特点，探讨建立外燥动物模型的途径， 并通过实验研究观察外燥动物模型的病理变化规律，对外燥动物模型进行 评价，为建立稳定的、可靠的、可重复的外燥小鼠动物模型提供依据。 一、理论研究 (一)外燥小鼠模型遣模因素的选择 中医动物模型复制的诸多方法虽然各自有显著的优点，但是均有明显 的不足之处。课题组在导师张六通教授的指导下，回顾了半个世纪以来中 医证候动物模型的研究历程，认为中医证候动物模型的研究应该从三个方 面出发：优化动物模型的造模因素；建立规范的动物模型评价方法；选择具 有特征