小柴胡汤及拆方对小鼠体内抗流感病毒作用及机制的研究.pdf

中文摘要 目的 流感病毒可以引起呼吸道感染，发病急、流行广泛、传播迅速，老人、 小孩和慢性病患者群体感染易出现并发症，且病死率高。由于流感病毒表 面抗原能连续不断地发生抗原性漂移和转换，使本来有效的疫苗很快失 效，使得流感不断流行，对人民群众的身体健康造成极大威胁。流感病毒 引发的呼吸道感染属于中医时行感冒和风温的范畴。《伤寒论》中的名方 小柴胡汤为和解少阳的代表方。方中以苦辛微寒之柴胡为君，清疏少阳半 表之邪，以苦寒之黄芩为臣，清泻少阳半里之邪，二药相配共奏和解少阳 之功。佐以半夏，生姜和胃降逆止呕；人参，大枣益气健脾；炙甘草助参、 枣扶正，且调和诸药为使。全方寒热并用，攻补兼施，升降协调，有和解 少阳，疏利三焦，调达气机，宣通内外，运转枢机的作用。药仅七味而配 伍精当，组方严谨，疗效显著，安全可靠。研究小柴胡汤调节免疫机制抗 病毒感染的机制，以及各配伍组间的协同作用机理，对于揭示经方配伍治 疗的科学性和严谨性，弘扬祖国传统医药学，发掘祖国传统医药学宝库， 指导临床治疗，都具有重要的意义。 方法 本实验通过模拟人类呼吸道病毒感染，复制出呼吸道病毒感染的实验 小鼠模型，将其分为不同组别，以病毒唑作为西药对照组，通过小柴胡汤 全方及柴芩，姜夏，参枣草，柴芩+姜夏，柴芩+参枣草等各拆方的治疗， 运用免疫学等现代生物科学的先进技术方法，观察小柴胡汤及其拆方的作 用机制，探求小柴胡汤“扶正祛邪与“和法’’的本质，寻求配伍的基本 规律。具体方法如下： 1、通过两次病毒的鼠肺适应过程，再经鸡胚尿囊腔接种传代，制备 新鲜毒种。 2、测定小鼠体内病毒滴度，得到病毒的LD，。，以备小鼠体内实验时 使用。 3、将小鼠分为9组，经造模和治疗后，用精密电子秤称量小鼠体重 及肺重，计算肺指数及肺指数抑制率，来观察小柴胡汤及其拆方对流感病 毒感染小鼠的保护作用。 4、将小鼠分为9组，经造模和治疗后，眼球采血，取血清，运用双 抗体夹心ELISA法测定各组小鼠血清中肿瘤坏死因子一0【(TNF—o【)和白 细胞介素一2(IL-2)的表达水平，观察小柴胡汤及其拆方对流感病毒感染小 鼠免疫功能的调节。 结果 1、小柴胡汤全方组，柴芩组，柴芩+姜夏组及柴芩+参枣草组的肺指 数与空白对照组比较P0．05，表明小柴胡汤及含有柴胡，黄芩的各拆方能 降低流感病毒感染小鼠的肺指数，表明小柴胡汤及其拆方对流感病毒感染 小鼠均有保护作用，且以全方组为最佳。 2、比较不同处理组间的TNF-O【的浓度可知：空白对照组明显高于正 常组，差异有统计学意义(P0．01)，提示甲1型流感病毒感染后小鼠体内 TNF-0【释放增多，可能对机体造成炎性损伤；小柴胡汤全方组，柴芩+参 枣草组和参枣草组小鼠血清TIqF-o【低于空白对照组，差异有统计学意义 (Po．05)，提示各组可以降低小鼠血清中由于流感病毒感染而升高的 TNF—O【含量，从而可能减轻炎症反应；病毒唑组，柴芩组，柴芩+姜夏组 和姜夏组小鼠血清TblF-0【也有下降，但和模型组比较差异无统计学意义。 3、比较不同处理组间的IL-2的浓度可知：空白对照组小鼠血清IL-2 低于正常组，差异有统计学意义(PO．01)，提示甲l型流感病毒可以导致 IL一2明显降低，小鼠免疫功能明显受到影响；病毒唑组高于空白对照组， 差异有统计学意义(Po．01)；小柴胡汤组，柴芩组，柴芩+姜夏组，柴芩+ 参枣草组小鼠血清IL-2明显高于空白对照组，差异有统计学意义 (Po．01)，提示各组对小鼠因流感病毒感染而下降的免疫功能有明显的提 高作用；参枣草组和姜夏组小鼠血清IL-2也有升高，但和模型组比较差 异无统计学意义。 结论 拆方研究是目前应用于中药复方组方理论研究的最为常用的方法，运 用此研究方式能深入了解中药复方配伍的规律。综合本实验结果，小柴胡 汤具有明显的抗流感病毒作用，且能有效防止过激的炎症反应对机体造成 的免疫性损伤，其作用优于各拆方；在小柴胡汤方剂中，以柴芩配伍的各 组复方抗流感病毒的作用最强，表明在该方剂中，主成分柴胡，黄芩在抗流 感病毒感染环节中可能起着主要的作用，而人参、大枣、甘草则可能主要 起到提高机体免疫力的作用。为小柴胡汤的临床应用和进一步研究提供了 一定的实验依据。 l SA 关键词小柴胡汤；流感病毒；TNF-Q；IL-