合江县斯氏肺吸虫病流行病学调查，JAK-STAT和NF-Kβ在此病实验动物肺、肝、脑中的表达和病理观察.pdf

、{’ 13 合江县斯氏肺吸虫病流行病学调查，JAK．STAT和NF．K 在此病实验动物肺、肝、脑中的表达与病理观察 李珍炼1，张锡林2王英2钱宝珍3，陈文碧I， H4，王光西馕 Sugiyama 摘 要 目的：了解合江县及毗邻地区肺吸虫病流行现状；观察斯氏肺吸 虫病实验动物模型肺、肝、脑组织超微病理结构，观察JAK-STAT、 NF-K B通路表达。方法：溪蟹分部位解剖并计算囊蚴感染率(度)， 问卷调查，肺吸虫病金标渗滤试剂盒(DIGFA—Kit)检测血清抗体，抗 体阳性者做肝功检查；自流行区采集溪蟹，分离斯氏肺吸虫囊蚴， 经腹腔注射感染犬，3月后剖杀，取肺、肝组织并检获成虫备用，肺 吸虫成虫制备抗原，用脑立体定位仪微量注射肺吸虫抗原至大鼠大脑 皮质建立大脑损伤模型，对照组注射生理盐水，24h后解剖大鼠取脑 组织；固定、切片。光镜下观察虫体周围和抗原注射周围的组织细胞 反应，电镜下观察超微病理结构改变，免疫组织化学方法观察JAK -STAT和NF—K B信号通路的表达活性。结果：(1)第二中间宿主以 锯齿华溪蟹为主，川南流行区溪蟹的肺吸虫囊蚴携带率为92．37％ Skrjabi 阳性率为4．84％(24／496)，川南流行区人群有生食和半生食溪蟹的 习惯，且感染与镇村、职业、年龄有关，差异有统计学意义(PO．05)， 血清肺吸虫抗体阳性者肝功结果显示Y球蛋白升高，白球蛋白比例 1 倒置；(2)斯氏肺吸虫病肺、肝、脑组织损害的动物模型建立，感染 犬肺和肝表面有突起结节，质稍硬，有纤维疤痕形成。HE显示感染 犬支气管腔有坏死细胞碎屑或虫卵，肺泡有虫卵沉积，卵周有淋巴细 胞浸润，肺泡囊有陷塌，肺泡隔破坏；感染犬肝切片见坏死灶，嗜酸 性粒细胞浸润及嗜酸性脓肿形成，坏死周围有肉芽肿及纤维组织包 裹，肝细胞气球样变，萎缩、变性、坏死，肝窦扩张；抗原注射大鼠 脑血肿周围组织水肿明显，且局灶状坏死，神经元皱缩，尼氏小体溶 解，周围出现间隙，神经突呈浅淡或消失，可见单核细胞及胶质细胞 反应。电镜显示感染犬肺可见I、II型上皮细胞肿胀、剥脱，细胞核 破坏，线粒体肿胀、嵴断裂，内质网扩张、空泡样变；大量渗出液， 嗜酸性粒细胞，单核细胞浸润；肺泡隔破坏，细胞水肿破坏。感染犬 肝细胞水肿，细胞器破坏，线粒体肿胀、内质网扩张，肝血窦红细胞 破坏，内皮细胞水肿。抗原注射组大鼠大脑皮质神经元胞体肿胀，核 移位且形状不规则，核膜凸凹不平，核质溢出；染色质为絮状；线粒 体肿胀，粗面内质网扩张呈囊泡化；脂褐素较多。(3)免疫组化显示 正常犬肺中STAT和NF-KB弱阳性表达；感染犬肺可见STAT和NF— K13阳性细胞，免疫阳性物质呈棕褐色，NF—K13在肺气道表达多， O．05)。正常犬肝中STAT和NF—K13弱阳性表达：感染犬实验组肝可 见STAT和NF—K13阳性细胞，以肝细胞坏死区明显，胞质和胞核中 正常对照组大鼠脑中STAT和NF—K13弱阳性表达：抗原注射组大鼠 脑中可见STAT和NF-KB阳性细胞，以大脑皮质损伤区明显，胞质 和胞核中见阳性表达，组间存在显著性差异(x2=476，F=447，P O．05)。结论：(1)肺吸虫在肺、肝、脑组织中机械破坏作用和炎症 病理反应激活了JAK-STAT、NF-KB信号通路的表达。(2)肺吸虫病 引起组织超微结构改变：细胞肿胀，线粒体肿胀，内质网扩张。(2) 川南流行区肺吸虫病的隐性感染依然存在；肺吸虫病对当地居民尤其 是中小学生存在着很大的危害：应加强肺吸虫病防治知识的宣传和教 育，制定相应的防制措施，阻断该病在川南地区的流行。 基金项目：四川省教育厅科研基金(NO．2005A067) 日本第二期健康科学基金(2007) 》 作者单位：1．泸州医学院病原生物学教研室(四川泸州646000) 2．第三