抗肺纤颗粒对博来霉素致大鼠肺纤维化模型支气管肺泡灌洗液中PDGF-BB及其TNF-α表达的干预.pdf

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抗肺纤颗粒对博来霉素致肺纤维化模型大鼠支气管肺泡灌洗液 中PDGF.BB及TNF.仪表达的干预 摘 要 目的:通过观察中药抗肺纤颗粒对博来霉素致肺纤维化大鼠支气管 growth necrosis factor-BB,PDGF.BB)、肿瘤坏死因子(tumorfactor.0【,TNF.or)、 细胞计数及分类表达的干预,以及肺组织病理变化、羟脯氨酸(即旧) 含量的影响,探讨抗肺纤颗粒治疗肺纤维化的作用机制,为抗肺纤颗粒 临床治疗肺纤维化提供实验依据。方法:将45只健康雌性SD大鼠(体 重190.2109/只),采用随机数字表法分为3组:生理盐水对照组(N组), 博来霉素模型组(M组),抗肺纤颗粒组(K组),每组15只。具体方 法:(1)N组:气管内注入0.9%N.S 0.2ml(1ml/k体重)随后每日给 予胃内灌入0.9%N.S4ml进行干预;(2)M组:气管内灌注博来霉素 纤维化,随后每日用0.9%N.S(剂量与用法同N组)进行干预;(3) K组:气管内注入博来霉素(剂量与用法同M组),随后开始给予抗肺纤 4ml中)灌胃进行干预。各组动物 颗粒(19/1009/日,溶于0.9%NS 于气管内灌注后第7、14和28天分别处死5只大鼠,收集左肺组织并 使用4%多聚甲醛固定,石蜡包埋切片行HE及Masson染色,观察肺 组织病理变化、判断肺泡炎及肺纤维化程度,肺组织匀浆测定羟脯氨酸 含量,右肺支气管肺泡灌洗收集支气管肺泡灌洗液,进行细胞分类、计 数,以及用酶联免疫吸附实验法(ELISA法),测定支气管肺泡灌洗液 上清液中PDGF。BB及TNF.仅的含量。结果:(1)病理切片观察N组: 肺泡腔内未见炎性细胞浸润,肺泡间隔无增宽;M组:HE染色显示,第 7天时肺泡炎最重,肺泡腔和肺间质内可见大量炎性细胞浸润,14天时肺 泡腔内炎症细胞明显减少,成纤维细胞增多,胶原明显增多,肺泡结构 破坏,肺泡隔增宽,28天肺纤维化程度明显加重,肺泡间隔明显增宽, 肺泡腔明显缩小,部分肺泡腔塌陷消失,胶原纤维较前增多;Masson 染色镜下观察:出现被染为蓝色的胶原纤维明显增多,肺泡腔几乎消失, 由片状胶原纤维和成纤维细胞占据,形成严重的肺纤维化。K组各时间 点肺泡炎及纤维化程度均较M组轻。评分分析示:K组肺泡炎和纤维化 程度明显低于同期M组,与M组比较有显著统计学意义(PO.01);(2) 支气管肺泡灌洗液中细胞计数及分类, M组及K组BALF中细胞总数 在第7天达到高峰,在第14天开始回降,各组与N组比较,细胞总数 间点比较细胞总数减少,差异有统计学意义(Po.05);各组与N组比较, 肺泡巨噬细胞虽比例降低,但绝对数增加,差异有统计学意义; K组7 天、14天组与M组相应时间点比较肺泡巨噬细胞比例升高但绝对值下 降,差异有统计学意(Po.05);各组与N组比较,中性粒细胞比例均增加, 差异有统计学意义佃o.05);K组7天、14天组与M组相应时间点比较, 中性粒细胞比例及绝对值均减少,差异有统计学意义(Po.05);各组与N 组相应时间点比较,淋巴细胞比例均增加,差异有统计学意义(Po.05), K组7天、14天组与M组相应时间点比较淋巴细胞比例及绝对值均下 定M组第7天大鼠肺组织羟脯氨酸含量开始增高,第14天、28天, 大鼠肺组织羟脯氨酸含量进行性增高,都明显高于N组,差异有显著统 低于M组,差异有显著统计学意义P0.01);(4)支气管肺泡灌洗液中 PDGF.BB、TNF.0【的测定:N组BALF中PDGF.BB的表达含量低,且第 中TNF.0【、PDGF.BB水平于各时间点均明显高于N组,差异有统计学 意义(PO.05)。结论:1.肺纤维化模型组和抗肺纤颗粒组与正常对照组比 较:支气管肺泡灌洗液中的细胞总数增加,巨噬细胞比例虽下降,但绝 对数增加,而中性粒细胞、淋巴细胞比例明显增加。提示巨噬细胞、中 性粒细胞、淋巴细胞均参与了肺损伤和肺纤维化,而抗肺纤颗粒能够减 少肺泡巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞的渗出,减轻早期的肺泡炎 个时间点较模型组下降,推测该药物可能抑制PDGF.BB和T

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