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致 谢
本论文是在导师申进文教授、戚元成副教授和张玉亭研究员的悉心指导下完
成的。从论文的选题、实验设计、实验过程到论文的撰写、修改,每一个环节都
倾注了导师们大量的心血。导师们渊博的知识、敏锐的思维、开阔的思路、严谨
的治学作风、勤奋忘我的工作作风和对科学执着追求的精神,以及宽于待人、严
于律己的高尚品格,使我受益匪浅,并对我今后的工作、学习和生活产生深远的
影响。在此,谨向申老师、戚老师和张老师表示我最衷心的感谢和最诚挚的敬意!
感谢贾新成教授、邱立友教授、吴坤教授、陈红歌教授、麻兵继副教授、张
世敏副教授、宋安东教授、刘亮伟教授、王风芹副教授、王明道副教授、刘新育
副教授、高玉千老师及生命科学院教学实验中心微生物实验室的各位老师在我学
习和实验中给予的帮助和建议!
感谢师兄王震、徐柯、决超、赵旭、周航、常路路、张朝辉、刘天翔、曹育
博、孙强,师姐李燕、冯雅岚、余海尤、吴婷婷、关园园、张丹娜、孙晓萍,师
弟黄千慧、陆舒冰、张广、赵帅举,师妹李芳、王瑞瑞、薛元、卢娇娇、梁思思、
张雪丽、张宇,在实验过程中给予我的大力支持和帮助!
感谢李会杰、史红鸽、史超文、刘巧宁、韦学博、柴冉、张明月、刘冬忍等
同学在学习和实验中给予我的帮助,三年来的共同学习和生活,我们结下了深厚
的友谊。在此,向你们表示感谢!
感谢所有关心、支持和帮助过我的人!
最后,还要深深感谢我的奶奶、父母、妹妹和未婚妻,是他们无私的奉献和
支持使我顺利完成了学业。谨向他们表示最衷心的感谢!
段庆虎
2013年5月
目 录
摘 要……………………………………………………………………………………………1
第一章文献综述…………………………………………………………………………………2
1.1几丁质酶…………………………………………………………………………………2
1.1.1几丁质酶的分类…………………………………………………………………2
1.1.3几丁质酶的催化机制……………………………………………………………2
1.1.4几丁质酶活性测定方法…………………………………………………………3
1.1.5几丁质酶的作用…………………………………………………………………3
1.1.6几丁质酶基因克隆………………………………………………………………4
1.1.7几丁质酶基因表达调控…………………………………………………………4
1.1.8植物几丁质酶的研究……………………………………………………………4
1.1.9动物几丁质酶的研究……………………………………………………………5
1.1.1
0真菌几丁质酶的研究…………………………………………………………..5
1.2丝状真菌基因功能的研究方法…………………………………………………………5
1.3食用菌转化方法研究……………………………………………………………………7
1.3.1
PEG介导转化法………………………………………………………………….7
1.3.2限制性内切酶介导整合法(REMI)…………………………………………..7
1.3-3基因枪法…………………………………………………………………………7
1-3.4电击法……………………………………………………………………………8
1.3.5农杆菌介导转化…………………………………………………………………8
1.4平菇遗传转化的研究……………………………………………………………………9
第二章平菇几丁质酶基因的克隆与生物信息学分析………………………………………..10
2.1材料和方法…………………………………………………………………………….10
2.1.1材料……………………………………………………………………
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