谷胱甘肽生产菌种的选育及摇瓶发酵的研究.pdfVIP

谷胱甘肽生产菌种的选育及摇瓶发酵研究 摘要 L．半胱氨酸和甘氨酸缩合而成的一种同时含有r．谷氨酰基和巯基的生物活 性三肽化合物。在临床上主要用于治疗各类肝炎、肿瘤和白内障，同时可解 除由有毒化合物和重金属离子引起的中毒。近年来发现谷胱甘肽还具有抑制 艾滋病毒的功效。谷胱甘肽由于其特殊的功能正在被应用到各种领域，而我 国的谷胱甘肽完全依赖进口，实现谷胱甘肽的国产化迫在眉睫。文中对谷胱 甘肽高产菌株的选育及培养条件进行了研究。 本研究以酿酒酵母为出发菌株，先对其进行紫外线诱变，以氯化锌为抗 性标记，获得了抗氯化锌突变株ZW．8(ZnCl2r)，该突变株经摇瓶发酵后， 为进一步诱变的出发菌株，以乙硫氨酸为筛选标记，用硫酸二乙酯进行诱变。 该突变株经摇瓶发酵后谷胱甘肽总量达69．50 mg／L，比出发菌株的GSH总 量提高了41％。经十次传代培养，发酵液中谷胱甘肽总量平均值为 70．18mg／L，是一株性状较稳定的优良菌株。 考察。研究表明该突变株产谷胱甘肽最适培养条件为：培养温度30。C，培 验确定培养基基本组成是酵母粉1 量的影响。确定在培养基中添加能明显促进菌体积累谷胱甘肽的四种无机盐 O．19／L。优化 if；J-MgS047H20O．19／L，KCIO．19／L，MnS040．19／L，FeS04 后谷胱甘肽总量达85．45mg／L，比优化前提高了22．9％。 考察了不同氨基酸种类对突变株积累GSH的影响。半胱氨酸、蛋氨酸、 谷氨酸能促进GSH的产生，但对菌体的生长没有促进作用。半胱氨酸作为 前体氨基酸对积累谷胱甘肽效果最明显。赖氨酸、异亮氨酸有利于细胞生长， 但是对GSH的积累有抑制作用。丙氨酸、色氨酸对GSH积累和细胞生长影 响不大。组氨酸对细胞生长和GSH积累都不利。 量达到88．89mg／L，比出发菌株提高了近50％。 关键词：谷胱甘肽，酵母菌，菌种选育，发酵优化 H SoNTHEBREEDINGoF STUDIE PRoDUCERANDITS CoNDITIoN ARSTRACT The isoneofthe major antioxidantmoleculesofcellsandis to avitalrolein the play buffering thought cell reactive andtoxic is used against oxygenspecies eletrophiles．GSHwidely be asmedicineinthetreatmentofliverand disease．GSH may ophthalmological involvedinHIV havebeen for expressions，andpro—GSHdrugs