CDV免疫蛋鸡血清抗体与卵黄抗体的消长规律及其相关性分析.pdfVIP

第 34卷 第 5期 家畜生态学报 Vo1．34NO．5 2013年 5月 ActaEcologiaeAnimalisDomastici Mav2013 CDV免疫蛋鸡血清抗体与卵黄抗体 的消长规律及其相关性分析 庄金秋 ，梅建 国 ，姚春 阳 ，沈志强 ，丁 壮 ¨ (1．吉林大学 畜牧兽 医学 院，吉林 长春 130062；2．山东省滨州畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600) [摘 要] 为 了解产蛋鸡对犬瘟热病毒杭原的免疫反应及其血清抗体和卵黄抗体的消长规律 及相关性，为制备卵黄抗体提供依据，将犬瘟热病毒接种 Vero细胞和 DF1细胞进行传代并测 定其病毒滴度 ，选取细胞病变 出现早，病毒滴度高的Vero细胞毒作为接种病毒抗原免疫蛋 鸡。通过每 10d进行蛋鸡免疫一次，四免后每 30d加强免疫一次的方法进行免疫。免疫前和 免疫后每 10d采血分离血清和每 5d收集鸡蛋提取卵黄抗体 ，用琼脂扩散法和间接 ELISA 法 测定其抗体水平。结果显示，血清抗体比卵黄抗体的滴度 高，两者间呈正相关性 ，卵黄抗体 出 现较血清抗体迟 3～5d，卵黄抗体在三免后 3～5d就 已达到较高水平 ，此 时即可开始收集鸡 蛋制备卵黄抗体 。 [关键词] 犬瘟热病毒 ；血清抗体；卵黄抗体 ；消长规律 [中图分类号] $811．6 [文献标识码] A [文章编号] 1005—5228(2013)05—0021—04 犬瘟热 (Caninedistemper，CD)是 由副粘病毒 卵黄抗体 (IgY)作为一种新 型高效 的生物防治剂， 科麻疹病毒属 (Morbillivirus)的犬瘟热病毒 (Canine 已被广泛应用于家禽、猪等多种动物疾病 的防治 。 distempervirus，CDV)感染引起的多种动物发生的 本研究旨在 了解蛋鸡对 CDV抗原 的免疫反应 ，及 一 种急性、高度接触性传染病 。CD 的死亡率可高 其血清抗体和转移卵黄抗体的消长规律及相关性 ， 达 80 ，素有 “毁灭性传染病”之称l1]。CDV 能引 从而为制备 CDV卵黄抗体提供依据。 起大批犬、貂、狐等动物发病 ，病死率 3O ～80 ， 1 材料与方法 雪貂高达 1009／6E引。CDV 自然感染宿主除食 肉 目 所有 8个科外 ，还扩展到偶蹄 目猪科 、灵长 目的猕猴 1．1 材料 属和鳍足 目海豹科等多种动物 ，CDV 自然感染的动 1．1．1 病毒和细胞 CDV 弱毒疫苗株 ，由山东省 物范围还有不断扩大 的趋势 ，其危害性也越来越 滨州畜牧兽医研究院保存 。Vero细胞 (非洲绿猴肾 大 ]。因此早期 、快速 的犬瘟热诊治对养犬业 、毛 细胞系)和 DF1细胞 (鸡胚成纤维细胞系)，由本研 皮动物养殖业和野生动物保护业具有重要 意义_5]。 究院生物资源室提供 。 目前对 CD 尚无特效 的治疗药物和方法 ，疫苗接种 1．1．2 试验动物 蛋鸡 20只：购 自山东滨州某蛋鸡 是唯一有效的防制措施 。当前国内外使用的常规疫 养殖场，隔离饲养观察一个月后，取临床观察健康，营 苗多为灭活苗和弱毒疫苗 ，前者只能诱发体液免疫 养 良好，产蛋正常，CDV检测阴性的蛋鸡为试验动物。 应答 ，后者能与强毒一样可以引起体液和细胞免疫 1．1．3 主要试剂和 器材 优级新生牛血清 (兰州 反应 ，但其存在热稳定性差 、易受母源抗体干扰及对 民海生 物)，DMEM 干粉 培养基 和胰 酶 (1：250) 某些毛皮动物毒力过强等弊端 ]。注射高免血清抗 (Invitrogen)，倒置荧光显微镜 (重光 Coic