Cd^2＋人工抗原的制备及其抗体特性.pdfVIP

石 北 摩 业 学攉 2011，20(6)：4347 ActaAgriculturaeBoreali—occidentalisSinica Cd2+人工抗原的制备及其抗体特性 张海棠 ，姜金庆 ，王顺来。，刘耀东 ，王淑云。，王 自良 (1．河南科技学院 动物科学学院，河南新乡 453003；2．河南省新乡市辉县畜牧局，河南新乡 453600 3．河南科技学院新科学院，河南新乡 453003) 摘 要 ：用异硫氰酸苄基 乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合 Cd抖合成cd-ITCBE半抗原，异硫氰酯法制备免疫抗原 Cd—ITCBE—BSA，紫外分光光度法(UV)、SDS和 电感耦合等离子体质谱法(ICP—MS)进行鉴定 ；用 Cd ITCBE—BSA免疫 Balb／C小 鼠，间接 ELlSA测定多抗血清(pAb)效价 ，阻断 ELISA鉴定其敏感性，交叉反应 试验鉴定其特异性 。结果表 明，Cd—ITcBE—BSA偶联成功，Cd—ITCBE—BSA 中BSA和 Cd 的含量分别为 7．1 g／L和 191．7mg／L；间接 ELISA效价达到 l：(5．12×10)，阻断 ELISA检测 Cd-EDTA 的 IC5。为 26．9 “g／L，除与 Hg—EDTA具有较强交叉反应外，与 EDTA及其他金属离子鳌和物无交叉反应 ，获得高效价、敏 感、特异的Cd pAb，为 Cd 残 留免疫学检测方法 的建立奠定基础。 关键词 ：Cd ；半抗原；人工抗原；抗体 ；特性 中图分类号：T$207．3；$859．84 文献标志码 ：A 文章编号：1004—1389(20l1)06—0043—05 SynthesisofArtificialAntigenandCharacteristics ofPolyclonalAntibodyofCadmium Ion ZHANG Haitang ，JIANGJinqing ，WANG Shunlai。， LIU Yaodong 。W ANG Shuyun。andW ANG Ziliang (1．SchoolofAnimalScience，HenanInstituteofScienceandTechnology，XinxiangHenan 453003，China 2．BureauofAnimalHusbandryinHuixianCity，XinxiangHenan 453600，China； 3．XinkeCollege，HenanInstituteofScienceandTechnology，Xinxiang Henan 453003，China) Abstract：ArtificialhaptenCd—ITCBE wassynthesizedusingisotrhiocyanobenzyl—EDTA (ITCBE)to chelatecadmium ion(Cd抖)．Themethodofisothiocyanate(ITC)wasusedtoCOnjugateCd—ITCBE to bovineserum albumin (BSA) andartificialimmunogen Cd—ITCBE—BSA wasobtained．Ultraviolet (UV)，sodium dodecylsulfatepolyacrylamidegelelectropheresis(SDS—PAGE)and inductivelyCOU— pledplasmamassspectrometry(ICP—MS)wereusedtoidentifyCd—ITCBE-BSA．Balb／C micewere immunizedwithCd—ITCBE—BSA，thetitresofpolyclonalantibody (pAb)wasdetectedby indirect ELISA 。thesensitivityofpAbwasidentifiedbyblockingELISA andthespecificityofpAbwasidenti— fledbycross—