肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝再生修复的影响.pdfVIP

第 26卷 肝 胆 胰 外 科 杂 志 第 3期 实验研究 · 肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝再生 修复的影响 吴志伟，段文彪，刘赞，宋才鑫，段建文，俞富祥 ，张启瑜 (温州医科大学附属第一医院 肝胆胰外科，浙江 温州 325000) [摘 要] 目的 探讨肝星状细胞 (hepaticstellatecells，HSCs)在大鼠肝部分切除术后对肝损伤修 复的影响。方法 体外实验部分：将大鼠肝星状细胞 (HSCs)与大鼠酐细胞系 (BRL-gA)共培养，CCK-8比 色法检测细胞增殖情况；ELISA法检测培养肝星状细胞上清液中细胞因子，即肝细胞生长因子 (hepatic growthfactor，HGF)、胰岛素样生长因子 (insulingrowthfactor，IGF)、表皮细胞生长因子 (epidermal growthfactor，EGF)、转化生长因子一。【(transfactorgrowthfactor-cc，TGF-~)含量。体内实验部 分；将45只260～330g健康雄性sD大鼠随机分为三组：正常组 (生理盐水组)、对照组 (肝星状细胞培 养液组)、实验组 (肝星状细胞培养上清液组)。各组分别于肝大部切除术后第3、7、l2天取血清检测肝功 能情况并计算肝再生指数；肛染色切片显微镜下观察肝脏病理结构改变情况；免疫组织化学染色法检测增 殖细胞核抗原 (proliferatingcellnucleusantigen，PCNA)、平滑肌肌动蛋 白(Ⅸ一smoothmuscleactin， o一【SMA)、甲胎蛋白 (alphafetalprotein，AFP)及 白蛋白 (albumin，ALB)的表达情况。结果 ①CCK- 8法检测肝星状细胞能促进肝细胞增殖 (尸0．05)；②上清液较培养液中细胞因子HGF、TGF一0含【量多，差 别有统计学意义 (尸0．05)；③实验组肝再生指数比对照组大，差别具有统计学意义 (尸0．05)；④实 验组大鼠AST随着时间的推移，较对照组下降明显，差别有统计学意义 (P0．05)；⑤实验组PCNA表达量 较正常组、对照组增多，差别有统计学意义 (P0．05)；⑥平滑肌肌动蛋白、白蛋白、甲胎蛋白三组间差 别不显著 (尸0．05)。结论 ①体外肝星状细胞能促进肝细胞增殖；②肝星状细胞培养上清液能促进大鼠 肝部分切除术后肝再生，其分泌的多种细胞因子在肝损伤再生修复中起 了重要作用。 [关键词] 肝星状细胞；肝再生；肝细胞；增殖细胞核抗原 (PCNA)；大鼠 [中图分类号]R735．7 IX献标识码]A [文章编号]1007-1954(2014)一0230—05 Experimentalstudyontheeffectofhepaticstellatecellsonratliverregenerationandrepairafter partialhepatectomy WUZhi-wei，DUANWen—biao，u Zan，eta1．DepartmentofHepatobiliary＆Pan— creaticSurgery,theFtrstAffiliatedHospitalofWenzhouMedicalUniversity,Wenzhou．Zhejiang325000,China objectiveToinvestigatetheeffectandmechanismofhepaticstellatecells(HSCs)onratliver regenerationandrepairafterpartialhepatectomy．MethodsHSCswereco—culturedwithhepatocytes(BRL·3a) invitro．TheproliferationofBRLcellswasdetectedbyCCK一8testkit．Thecytokinessecretedbyhepaticstellate cellsweretestedbyELISA testkit．Invivoexperiment：Foay·fivemaleSpragueDawleyratswererandomly assignedtothreegroups(n=