肝X受体负性调控枯否细胞中Toll样受体4通路减轻移植肝脏缺血再灌注损伤.pdfVIP

． 440． 中国新药与临床杂志 (ChinJNewDrugsClinRem)，2014年6月 ，第 33卷 第 6期 [文章编号]1007—7669(2014)06—0440—06 肝X受体负性调控枯否细胞中Toll样受体 4通路减轻移植肝脏缺血再 灌注损伤 刘双权 ，薛 强 ，成名翔 ，夏 丰 ，龚建平 ，涂 兵 (1．重庆医科大学附属第二医院 肝胆外科 ，重庆 400010；2．重庆医科大学附属第一医院 肝胆外科 ，重庆 400016) [关键词] 肝 X受体 ；枯否细胞；再灌注损伤 ；Toll样受体4 [摘要] 目的 探讨肝 x受体 (LXR)负性调控大鼠枯否细胞 (KCs)中Toll样受体4 (TLR4)通路对移 植肝脏缺血再灌注损伤 的影响。方法 密度梯度离心法分离培养 SD大鼠肝脏KCs，将获得的细胞随机分 为脂多糖 (LPS)组 、LPS+GW3965组、LPS+LXR拮抗剂组。动物实验选用雄性 SD大 鼠96只．随机 分为 GW3965预处理组 (GW39650．3mg·kg 于手术前 30min经尾静脉注射处理供体)、生理盐水对照组 (给 予等体积生理盐水)。两组均采用 改进 的Kamada两袖套法进行肝移植。Westernblot测定各组细胞 、 移植物中白细胞介素一1受体相关激酶4 (IRAK一4)、干扰素调节因子一3 (IRF3)蛋 白表达 ，EMSA测定各 组细胞 NF—KB的相对活性，酶联免疫吸附法检测 KCs培养上清液肿瘤坏死 因子 仅 (TNF一仅)、干扰素 8 (IFN—p)，于移植肝脏再灌注后 3、6、24h测定血清丙氨酸转氨酶 (ALT)，光镜观察肝脏组织的形态学 变化。结果 IRAK一4和IRF3蛋 白表达、NF-KB相对活性、TNF．仅和 IFN—B水平在 LPS+LXR拮抗剂组 最高 ，而在 LPS+GW3965组最低 (均P0．05)。GW3965预处理组各时间点组织的IRAK．4和 IRF3蛋 白表达量 以及血清ALT活性明显低于对照组 (P0．05)，GW3965预处理组各时间点肝组织的损伤均 明 显轻于对照组 (P0．05)。结论 激活LXRs能负性调控 KCs中TLR4信号通路的IRAK一4、IRF3的蛋 白 表达，抑制 NF-KB的活化和炎症 因子的释放，可减轻肝移植缺血再灌注损伤。 [中图分号类] R617 [文献标志码] A LiverXreceptorameliorateischemia—reperfusioninjuryoftransplantedlivers in ratsby down。。regulatingToll-_likereceptor4 signalingpathway in Kupffer cells LIUShuang—quan，XUEQiang，CHENGMing—xiang，XIAFeng，GONGJian—ping，TU Bing (．DepartmentofHepatobiliarySurgery，theSecondAffiliatedHospitalofChongqingMedical University． CHONGQING 400010，China；2．DepartmentofHepatobiliarySurgery，theFirstAffiliatedHospital of ChongqingMedicalUniversity，CHONGQING400016，China) [收稿 日期] 2013—06—27 [接受 日期] 2013—12—11 [基金项 目] 重庆市卫生局医学科研项 目 (2011-20148) [作者简介] 刘双权，男，硕士研究生，医师 ，主要从事肝脏缺血再灌注损伤的研究，E-mail：shuangquan@yeah．net：涂 兵，男，主任医师，博士，E-mail：bingtu@163．con _ [责任作者] 涂 兵 中国新药与临床杂志(ChinJNewDrugsClinReni)，2014年6月，第 33卷 第 6期 ·441· [KEYWORDS] liverXreceptor；Kupffercells；reperfusioninjury；Toll—likereceptor4 [ABSTACT] AIM ToinvestigatetheprotectiveeffectsofliverXreceptor