两性霉素B-聚氰基丙烯酸正丁酯纳米复合体治疗小鼠隐球菌性脑膜炎的实验研究.pdf

中英文摘要 mY0帅2m2㈣8哪㈣20眦4帆。帆 有关NP载体的研究日益受到学者们的重视，NP表面经过修饰后可以避免网状内皮系统 (reticuloendothelial system，RES)吞噬，提高药物在脑内的浓度，具有脑主动靶向作用。 本研究旨在筛选合适的纳米材料作为AmB的有效载体，并通过适当的表面修饰，使 之能够携载AmB通过BBB，以期达到治疗隐球菌性脑膜炎的目的。基于以上目的，本研 80，T-80)作为表面修饰剂，分别通过表征检测，优化制备工艺，制备 梨酯80(polysorbate 出符合脑靶向条件的两性霉素B一聚氰基丙烯酸正丁酯纳米复合体(AmB．PBCA_NP)。 为了得到纳米药物复合体具有脑靶向作用的直接证据，我们必须在脑组织内检测到 AmB的药物浓度，为此，我们先建立了检测生物样品中AmB浓度的高效液相色谱分析方 选用槲皮素为内标，并采用乙腈沉淀蛋白法作为生物样品的前处理方法。结果证明，该方 法简单、快速、经济实用，生物样品的内源性物质及代谢物均不干扰样品的测定，经方法 学认证，在各自的生物样品浓度范围内，均呈良好线性，r0．99，所有测定生物样品方法 小鼠体内药代动力学研究。 继而，我们用建立好的HPLC检测方法考察了小鼠血浆、脑组织及心、肺、肝、脾、 值明显低于纳米制剂，说明其脑靶向性并不理想。我们的纳米制剂则显示出了良好的脑靶 度值，此后缓慢升高，3h达峰值(133ng／g)，此后变化比较缓慢，浓度维持比较恒定。同时， 我们还观察了不同制剂的体内器官分布情况，结果发现，AmB．Doc由于不能穿越BBB， 脏器的浓度分布比较均匀，48h后大部分脏器中已检测不出药物浓度，但在肝脏和肾脏中 仍保留有相当的浓度值。AmB．L在大剂量应用后虽然能够透过BBB，但脑内浓度相对较 低，而且在体内其它各器官与AmB．Doc有相似的浓度分布，药物在肝脏中的浓度最高， 中英文摘要 其次为脾脏和肾脏。AmB．PBCA．NP在给药后随着时间的推移，药物缓慢释放，脑内浓度 逐渐升高，而肝、脾等脏器中几乎检测不到有药物分布，说明经纳米材料改性后的药物能 够成功地逃避网状内皮系统及吞噬细胞的吞噬，从而有利于增加药物在血液循环中的停留 时间，增加入脑几率。 型，该模型不同于以往全身真菌感染的动物模型，通过脑池内直接注射菌悬液造成菌负荷， 其主要感染部位在脑膜，可以更形象地模拟临床上的脑膜炎病变，从而更好地描述隐球菌 性脑膜炎的治疗效果。随后，我们采用该动物模型，重点考察了纳米制剂的疗效学指标， 均得到明显提高，同时，脑部染菌量则呈显著下降趋势。 实验最后，我们通过相关的生化学指标观察了纳米药物的毒副作用。结果显示， AraB．PBCA．NP在提高使用剂量、增强疗效的同时，对肝脏、肾脏及血液系统均未显示明 显的损害。与AmB．Doc相比，毒副作用明显降低。 综上所述，PBCA作为一种新的纳米药物传递与控释的载体，具有靶向性、缓释性、 定时性和稳定性等优点，而且可以在增加药物使用剂量的同时，减轻或避免其毒副作用。 生物医学和纳米技术的结合无疑会给隐球菌病的治疗带来更广阔的前景。 关键词 两性霉素B；纳米载体；高效液相色谱法；血脑屏障；隐球菌性脑膜炎；毒副作用 Abstracts isa diseasecaused most Cryptococcosissystemic byCryptococcusneoformans．But werefoundto with inclinic．Inrecent a hasbeen patients appearon