色谱-2011.ppt

表 填充柱气液色谱担体一览表 2、固定液 固定液：高沸点难挥发的有机化合物，种类繁多。 对固定液的要求： （i)有适当的溶解能力：对易挥发组分有足够的溶解能力； （ii）选择性好：对各组分分离能力强，即K/k差别大； （iii）挥发性小，避免流失 （iv）热稳定性好，不分解 （v）化学稳定性好，不与被分离组分发生不可逆的化学反应。 固定液分类方法 如按化学结构、极性、应用等的分类方法。在各种色谱手册中，一般将固定液按有机化合物的分类方法分为：脂肪烃、芳烃、醇、酯、聚酯、胺、聚硅氧烷等。 介绍一下按相对极性分类 首先规定：非极性物质角鲨烷（异三十烷）的相对极性为零， 强极性物质β，β’—氧二丙睛的相对极性为100。其它固定液的极性可用下列方法计算。 选择一对物质作为分离组分：如丁二烯和正丁烷 （1）分别在氧二丙睛和角鲨烷柱上测定相应的相对保留值，并取其对数 （2）然后在待测定极性的固定液柱上测定相应的保留值，并取其对数 （3）根据以下方法计算待测固定液的相对极性 氧二丙睛 角鲨烷 待测柱 q1=lg[(tR’(丁二烯)/tR’(正丁烷)] q2=lg[(tR’(丁二烯)/tR’(正丁烷)] qx=lg[(tR’(丁二烯)/tR’(正丁烷)] 待测柱的相对极性Px Px＝100－100(q1－qx)/(q1－q2) Px＝0～100 固定液的选择基本原则 “相似相溶”，选择与试样性质相近的固定相 非 中 弱 强 具体考虑如下： （1）对非极性组分：一般选择非极性固定液，出峰顺序：按沸点由低到高 （2）中等极性组分：选中等极性固定液，出峰顺序：沸点差别大，按沸点出峰；沸点差别小，按极性大小出峰 （3）强极性：选择强极性固定液，出峰顺序按极性大小出峰 （4）混合物：极性，出峰顺序：先非后极 如：苯和环己烷，沸点相近，但苯含派键，易与极性组分作用，故选择极性固定液分离效果好 三、定性定量方法 1、定性分析－保留值 色谱定性分析就是确定试样中的各组分 （1）用已知物对照进行定性 （i）单柱比较法 待定性物质 已知物质 （ii）双柱比较法：两支极性完全不同的柱子 待定性物质 已知物质 待定性物质 已知物质 （iii）峰高增量法： 待定性物质 待定性物质＋已知物质 （2）用经验规律定性：没有纯物质的情况下 （i）碳数规律：大量实验证明，在一定温度下，同系物保留值的对数值与其分子中的碳原子数成线性 lgtR’＝A1n＋C1 A1、C1为常数，n为碳数（n=3） 根据同系物中已知几个组分的保留值可推出同系物中其它组分的保留值。 （ii）沸点规律：在一定色谱条件下，同族具有相同C数的异构体，其保留值的对数值与其沸点成线性。 lgtR’＝A2Tb＋C2 A2、C2为常数，Tb为组分的沸点（K） （3）根据文献保留值定性：没有纯物质的情况下 （i）相对保留值定性法：用组分i与基准物质S的相对保留值γi.s作为定性指标对未知组分i进行定性的方法。 γi.s只与两组分的分配系数有关，固定相性质和柱温确定， γi.s 为定值。 在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。 （ii）保留指数法：又称Kovats指数 规定：正构烷烃的保留值指数为其C数乘以100。 如C－C－C－C－C－C，己烷，保留指数I为600 C－C－C－C－C－C－C，庚烷，保留指数I为700 被测物质的保留指数可采用两个相邻正构烷烃的保留指数进行标定。 测定时，将C数为n和n＋1的正烷烃加到样品x中，进行色谱分析若测得保留时间分别为tR’(n)、tR’(n+1)、tR’(x)，且tR’(n)tR’(x) tR’(n+1)、 则x的保留指数 然后与文献值比较。 例题：60摄氏度时在角鲨烷柱上正己烷，正庚烷和某组分的调整保留时间分别为262.1s、663.1s、359.4s，求该组分的保留指数，并确定该组分是什么物质。 解：由于tR’(6)＝262.1，tR’(7)＝663.1，tR’(x）＝359.4，n＝6 Ix＝100[6＋(lg tR’(x) －lg tR’(6))/ (lg tR’(7)－lg tR’(6))] ＝100×[6＋（lg359.4－lg262.1）/（lg663.1-lg262.1） ＝644 与文献值比较，可知该组分为苯。 定性小结： （1）色谱定性分析的任务是确定色谱图上每一峰所代表的物质。在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留时间。所以，在相同色谱条件下，通过比较已知物和未知物的保留时间或在固定相上的位置，即可对未知物定性分析。 （2）色谱法的不足之处是被分离组分（未知物）的定性较为困难。 （3）将色谱与质谱或其它光谱法联用，是目前复杂混合物中未知物定性的最有效方法。 2、