ampkα亚基小鼠骨骼肌生长发育及宰后糖酵解过程的影响.pdf

摘 要 kinase，AMPK)对动物骨骼肌生 AMP活化蛋白激酶(AMP．activatedprotein a 长发育有很大影响，并在动物宰后糖酵解过程中起着重要的调节作用。AMPK 催化亚基有a1、0【2两种不同的亚型，两者在动物骨骼肌生长发育及宰后糖酵解 过程中的作用目前仍不清楚。本研究通过基因敲除，基因筛选的方法选用野生 型小鼠，AMPKal基因敲除小鼠及AMPKa2基因敲除小鼠作为研究对象，探 讨AMPKal亚基和AMPKot2亚基在动物骨骼肌生长发育和霉后糖酵解过程中 的不同影响。其结果如下： 选取不同天数的小鼠检测其体重的发育性变化及不同组织的重量差异，结果 表明：AMPKotl基因敲除(AMPKalko)d鼠在出生后O天，7天，15天生长速度小 于野生型(WT)小鼠(PO．05)。2个月(成年)时，AMPKotlko／J、鼠的体重为19．929，野 ko)小鼠在出生后0天，7天，15天生长速度与野生型小鼠差异不明显， (AMPKa2 但是到成年时，AMPKa2 kotjs鼠的体重为28．389，野生型小鼠的体重为23．759， 表现出极显著性差异(PO．01)。比较成年小鼠的肌肉组织重量也表现出了极显著 性差异：AMPKal kod,鼠俳肠肌和股外肌重量都小于野生型小鼠(PO．01)；而 AMPKct2 kotJs鼠俳肠肌和股外肌重量则大于野生型小鼠(P0．01)。 采用石蜡切片及HE染色方法分析不同基因型小鼠的组织学特性，结果表明： AMPKal kotJs鼠在出生后0天，7天，15天胫骨前肌肌纤维直径小于野生型小鼠 ko小鼠 (P0．05)，成年时，两者之间的差异性表现为极显著(P0．01)，AMPKal 胫骨前肌肌纤维直径远小于野生型小鼠；AMPKa2ko小鼠在出生后O天，7天， 15天胫骨前肌肌纤维直径与野生型小鼠差异不明显，成年时，AMPKa2koJ鼠的 肌纤维直径则明显大于野生型小鼠肌纤维直径，差异为极显著(P0．01)。成年小 鼠比目鱼肌肌纤维直径差异性与胫骨前肌肌纤维直径一致：AMPKalko小鼠肌纤 ko／J、鼠肌纤维直径则明显大于野 维直径明显小于野生型小鼠(P0．01)；AMPKot2 ko小鼠比目鱼肌肌纤维密度明显高于野生型小 生型小鼠(PO．01)。成年AMPKal 鼠(P0．01)；而成年AMPKct2ko小鼠比目鱼肌肌纤维密度明显低于野生型小鼠 ko／J、鼠肌纤维数量 (P0．01)。在成年比目鱼肌肌纤维数量测定中发现，AMPKal 明显小于野生型小鼠(P0．01)；而AMPKa2ko小鼠与野生型小鼠肌纤维数量差 异则不明显。 AMPK活性迅速提高，与野生型小鼠变化趋势完全一致，都是在20min时活性达 活性一直没有明显提高，其活性变化趋势与野生型小鼠差异极显著(PO．01)。而 kodx鼠的ACC磷酸化趋势与AMPK磷酸 AMPK含量显著降低(PO．01)。AMPKotl ko小鼠同样是在20min时达到最大值，之后开 化一致，野生型小鼠和AMPKotl 始逐步下降，24h时消失；AMPKot2亚基被敲除后，ACC磷酸化程度没有明显提 高，与野生型小鼠ACC磷酸化程度差异明显(P0．01)。 测定小鼠宰后背最长肌糖酵解过程各项指标的变化，结果表明： 低，而AMPKa2 ko小鼠宰后pH值变化很小，与野生型小鼠相比差异极显著 累，而AMPKot2kodx鼠宰后乳酸蓄积缓慢，在20min时就与野生型小鼠乳酸积累 量差异不明显，AMPKot2ko小鼠的糖原含量显