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cla对奶牛乳上皮细胞活性和脂肪酸合成关键酶的影响
目 录
摘要……………………………………………………………………………………………………………………………．I
Abstract………………………………………………………………………………………………………………………．III
l前言…………………………………………………………………………………………………………………………．1
1．1共轭亚油酸概述…………………………………………………………………………………………．1
1．2奶牛乳脂组成及脂肪酸合成………………………………………………………………．1
1．2．1奶牛乳脂组成分析…………………………………………………………………………1
1．2．2乳脂脂肪酸合成关键酶………………………………………………………………．2
1．2．3乳脂脂肪酸合成关键酶转录因子……………………………………………………3
1．3共轭亚油酸对乳脂影响研究现状…………………………………………………………4
1．3．1共轭亚油酸对乳脂含量的影响…………………………………………………………4
1．3．2共轭亚油酸对脂肪酸合成关键酶基因表达的影响………………………………………．6
1．3．3共轭亚油酸对乳脂肪合成关键酶基因转录因子的影响…………………………．．．…7
1．3．4共轭亚油酸对乳成分及乳产量的影响………………………………………………。10
1．4奶牛乳腺上皮细胞体外培养的研究现状…………………………………………………。10
1．4．1常用牛乳腺上皮细胞建立方法………………………………………………………．．10
1．4．2乳腺上皮细胞系建立………………………………………………………………………ll
l。5课题意义…………………………………………………………………………………………………12
1．6课题内容…………………………………………………………………………………………………．12
2材料与方法………………………………………………………………………………………………。13
2．1实验原料……………………………………………………………………………………………．．．．13
2．1．1试验动物………………………………………………………………………………………．13
2．1．2主要试剂……………………………………………………………………………………………．13
2．2实验设备…………………………………………………………………………………………………………14
2．3试剂和培养液配制………………………………………………………………………………………．．．．15
2．3．1常用试剂的配制………………………………………………………………………………………l5
2．3．2细胞培养液的配制…………………………………………………………………………………．15
2．4实验方法…………………………………………………………………………………………………l6
2．4。ICLA溶液配制及分组…………………………………………………………………………．．16
2．4．2奶牛乳腺上皮细胞分离培养……………………………………………………………．．17
2．4．3
MTT试验检测两种CLA对奶牛乳腺上皮细胞生长的作用…………………………．．．．20
2．4．4
CLA作用奶牛乳腺上皮细胞凋亡检测……………………………………………………．．20
2．4．5乳腺中脂肪酸合成相关酶mRNA转录水平检测………………………………………。21
2．4．6乳腺细胞中关键酶SCD酶指数分析…………………………………………………………。24
2．4．7数据分析…………………………………………．．．……………………………………………………．25
东北农业大学工学硕士学位论文
3结果与分析………………………………………………………………………………………．．26
3．1奶牛乳腺上皮细胞分离培养………………………………………………………………26
3．1．1组织块法培养奶牛乳腺上皮细胞原代培养………………………………………。26
3．1．2奶牛乳腺上皮细胞分离纯化………………………………………………………．26
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