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LrrclO基因启动子的克隆 食品科学专业 研究生王君 指导老师陈祥贵 目的：小鼠心脏特异性表达基因LrrclO，在细胞中可能涉及了广泛的信号 调控过程。本研究旨在通过构建以LrrclO启动子及其两个截短启动子介导的LUC 报告基因载体，比较不同启动子片段在不同细胞中转录调控活性的差异，确定 不同启动子片段的启动子活性和具有启动子活性的的序列边界，为对LrrclO基 因表达调控的进一步深入研究奠定基础。 基因芯片表达数据，采用生物信息学软件进行多重序列比对。②根据LrrclO基 因上游序列设计引物，采用聚合酶链式反应从小鼠基因组DNA中扩增LrrclO基因 Kpn ‘ 测序验证插入片段的正确性。③将构建的重组载体用脂质体法分别转染hela并fl C2C12细胞，转染24h后，检测荧光素酶的表达值。 结果：①已在8个物种中发现LrrclO同源基因，同源基因间蛋白序列具有 Mouse 较高的保守性；各物种LrrclO的同源EST主要来自心肌，GNFlM Chip数据 期片段，三个片段分别与PGL3一Basic连接获得阳性克隆，提取的质粒经过Kpn 报告基因表达，结果表明，不同长度的LrrclO启动子截短序列的活性具有明显 检测不到报告基因的表达。 性密切相关；在700bp的截短启动子没有包含完整的基本启动子序列。 关键词：LrrclO：启动子；克隆；生物信息学 ofLrrclOGenePromoter Cloning Science or：Food Maj Jun Advisor：Chen Candidate：Wang Xianggui AIM：Lrrc1 in signal 0，annovel gene，mayparticipatemany heart-specific transduction orderto the ofthe activity processes．Ininvestigatetranscriptional the of thatare of Lrrc10anddefineboundaryregulatoryregion promotergene oflrrcl0 forthe truncatedconstructes employed responsibletranscription，we Dual-luciferase and assay promoteranalysisthrough reportersystem． METHODS：@eDNA ESTandtheirti