海绵中产生物表活性剂微生物的筛选及其性质研究.pdf

摘 要 摘 要 海绵是一大类低等多细胞动物，其体内及体表富集了大量的、不同种类的微生物。 本论文以筛选生物表面活性剂生产菌为目的，从海绵中筛选产生物表面活性剂的微生 物，并对其进行菌种鉴定，然后对其中表面活性和乳化活性均较好的菌株进行发酵条件 的优化，对产生的生物表面活性剂的性质进行了初步研究，这为该生物表面活性剂应用 于实际提供了理论基础。 本论文从繁茂膜海绵和南海海绵的研磨浆液中，经富集培养、血平板筛选和排油活 性测定，初步分离了38株产生物表面活性剂的微生物，再利用表面张力法从初筛菌中 筛选出2株产生物表面活性剂的优良菌株，编号分别为H10和S6X，其产生的生物表面 活性剂均可以把培养基的表面张力降到30．0mN／m以下。 对筛选出的菌株H10和菌株S6X进行了系统分类鉴定，通过16SrDNA同源序列比 对和系统发育树分析结合形态观察和生理生化实验，鉴定菌株H10为芽孢杆菌属的短小 芽孢杆菌(Bacillus palleronii)· 采用分光光度法测定菌株的生长曲线，并对两株细菌发酵液的乳化活性进行了测定， 其中帕氏假单胞菌S6X产生的生物表面活性荆具有良好的乳化性能，能使乳化液保持 80％以上的稳定性达14天以上。 通过单因素实验研究了接种量、温度、初始pH和溶氧量等因素对菌株S6X生长及 生物表面活性剂产量的影响。确定该菌株种子液的最佳摇瓶条件为：发酵温度30C，初 来的9．Ocra提高至12．Oem以上，达到了较好的优化效果。 本论文对菌株S6X产生的生物表面活性剂进行了提取和初步纯化，并利用TLC法 对该菌株产生的生物表面活性剂进行了定性分析，同时测定它的临界胶束浓度为28．6 mg／L。然后测定了该生物表面活性剂对盐浓度和热的稳定性，实验表明该表面活性剂对 热和盐浓度的变化具有较好的稳定性。 关键词：海绵，生物表面活性剂，生产菌，菌种筛选，菌种鉴定，发酵，临界胶束浓度 Abstract Marine arethemost amountsof invertebrates，and spends primitive high diversebacteriaresidewithin bacteriawas sponges．Screeningbiosurfactant·producing studiedinthis of systematically thesis，Microorganismscapableproducing couldbeisolatedfrommarine spongc． of be aseriesof biosurfactantscouldisolated Microorganismscapableproducing by steps andoil the enrichment method culture，blood including agar spreading of was screenedsurfacetension fermentation first—isolatedstrains supernatant