茯砖茶中降胆固类物质的研究.pdf

STUDYoN INFUZHUANBRICKTEA A to Thesis(orDissertation)Submitted Shaanxi of Scienceand University Technology inPartialFulfillmentofthe for the of RequirementDegree Masterof Engineering Thesis Jia．1iLV Supervisor：Professor 2014 May 茯砖茶中降胆固醇类物质的研究 摘要 茯砖茶是主要生产于湖南的中国古老茶类，可制成鲜奶、奶茶或熬煮成 清茶进行食用，研究表明其具有降血脂，降低人体胆固醇水平等保健功能。 茯砖茶降血脂成分的研究主要为茶多酚，茶多糖，茶色素等，其限制了茯砖 茶功能产品的开发及推广应用。冠突散囊菌为茯砖茶中的主要优势菌种，通 过自身微生物代谢影响茯砖茶的品质及风味，它是判断茯砖茶与其它茶叶不 同的重要标准之一。大量研究证明冠突散囊菌具有降血脂的作用，但目前的 相关研究主要集中于冠突散囊菌调脂的宏观效果及降脂机理等方面，不能够 反映出冠突散囊菌降脂代谢的具体化学成分。同时，其它茶叶种类黑茶，普 洱茶己被证明含有降血脂降血压生物活性作用的洛伐他汀等物质，红曲霉， 土曲霉，青霉等曲霉已被证明能够产生他汀类物质。而茯砖茶属于黑茶的一 种，冠突散囊菌属于曲霉属。 菌种冠突散囊菌中的降胆固醇类成分他汀类物质进行定性及半定量分析，其 研究结果如下所示： 1．以冠突散囊菌的菌落生长情况为指标考察不同培养方式对冠突散囊 菌生长的影响，将其分别接种于5％NaCl的CZG培养基、麸皮固体培养基、 液体发酵培养基上进行菌落生长繁殖情况的观察。结果显示：不同培养基上 菌落生长形态不同。冠突散囊菌在三种培养基上生长良好，在CZG和麸皮 固体培养基上菌丝生长较弱，易产生孢子，而在液体培养基上菌丝生长旺盛， 但产生孢子较弱。冠突散囊菌在5％NaCl的CZG培养基、麸皮固体培养基、 液体发酵培养基上生长的最佳时间分别为120h、168h、96h。 2．采用薄层色谱法分离茯砖茶，冠突散囊菌中他汀类组分，和洛伐他 汀标准品，辛伐他汀标准品进行对比性研究。选用4组展开剂，3种显色剂 对样品进行展开效果研究。结果显示：以氯仿：甲醇：水(25：3：1)为展开 剂，碘蒸气显色，茯砖茶分离出7个斑点，冠突散囊菌分离出9个斑点，其 中有2个明显棕色斑点，标准品对照后确定为目标斑点，Rf值分别为0．758， 0．818。因此，确定茯砖茶，冠突散囊菌中含有他汀类的可能。 3．选用2种标准品洛伐他汀、辛伐他汀作对照，采用紫外波长扫描对 实验收集的薄层组分中的降胆固醇类物质他汀类进行测定，结果表明：标准 其中238nm为最大吸收波长，冠突散囊菌的薄层组分的甲醇溶解液有3个 相对应的吸收峰，其表明冠突散囊菌中含有目标物质。 4．以保留时间为参考指标，采用高效液相分析了茯砖茶提取液、冠突 散囊菌固体培养物提取液、薄层斑点组分提取液、柱层析无色组分洗脱液、 冠突散囊菌液体摇床发酵提取液中的降脂目标组分，最终确定冠突散囊菌 固、液培养物的乙酸乙酯提取液中含有洛伐他汀，保留时间分别为4．339min、 15．209min，最高含量分别为0．550mg／kg、0．616mg