分枝杆菌bd66-6固定化发酵产雄烯二酮的研究.pdfVIP

分枝杆菌BD696--6固定化发酵产雄烯二酮的研究 摘要 ， 雄烯二酮(AD)是合成甾体激素类药物不可替代的中间体，随着薯芋皂素资 源日渐枯竭，利用微生物发酵生产AD是目前研究的热点课题之一。菌株 Mycobacterium 酵过程中存在菌体浓度低、发酵周期长、转化率低等缺点。许多研究表明，固 定化技术能有效保护细胞膜的完整性，促进目标产物的积累。本论文采用海藻 酸钠包埋法和硅藻土吸附法固定菌体细胞，探索固定化条件及发酵条件对分枝 杆菌BD696—6发酵产AD的影响，主要研究结果如下。 在单因素试验基础上，正交实验优化得到菌株BD696—6的最适固定化条 胶，静置固化时间1h；该条件下进行菌株BD696—6固定化细胞与游离细胞对比 加量59／L时，AD转化率最高达80．83％，且固定化细胞具有较好的贮存稳定性和 可重复利用性。扫描电镜显示以海藻酸钠为包埋载体时，营养物质可自由传输。 以硅藻土作为菌株BD696．6吸附载体，经吸附固定后，通过正交试验获得 硅藻上吸附固定化细胞的条件为载体添加量79／L、最佳接种量18％、甾醇添加 高了19．82％。对硅藻土吸附固定细胞发酵条件的研究表明，较适的摇床转速200 进作用，其中加入FeS04·7H20 0．19／L，AD转化率最高，其值为85．64％。 5L发酵罐中进行放大试验的结果表明，以硅藻土为载体，加入甾醇59／L时， AD转化率达到95．21％。 关键词：细胞固定化 海藻酸钠 硅藻土 发酵条件 甾醇 雄烯二酮 on Immobilized Study technologyproducing Androst一4一ene一3，17·dione by sp．BD696-6 ABSTRACT the intermediatesof Androst·4一ene-3，17一dione(AD)is key manysynthetical steroid the of drugs．With dioseorea bioconversionof depletion resources，the ADis the of this becominghotspot could domain．Mycobacteriumsp．BD696——6 transform ster01to inthe of androst一4一ene-3，17．dione，but microbial process transformationthere are thatthe problemsbiomassconcentrationistoo low，that the of fermentationistoo1 period