海藻多酚qsi大菱鲆腐败变质调控的初步研究.pdfVIP

海藻多酚QSI对大菱鲆腐败变质调控的初步研究 摘 要 本论文以25种海藻为研究对象，采用紫色杆菌(CV026)检测体系筛选出了 具有细菌群体感应抑制活性的海藻多酚，用紫外、红外光谱、高效液相色谱等方 Inhibitor，QSI)的结 法初步测定了海藻多酚群体感应抑制剂(QuorumSensing 构特征、化学组成。将海藻多酚QSI应用于大菱鲆的保鲜，评价了海藻多酚QSI 的保鲜效果及其对大菱鲆腐败菌群体感应的抑制作用。此研究丰富了以细菌群体 感应系统为靶点的水产品贮藏保鲜理论，也为水产品的保鲜提供了新的思路与途 径。 本论文研究内容包括以下3个部分： 1．海藻多酚细菌群体感应抑制剂(QSl)的筛选 采用水提和醇提两种方法对海藻多酚进行提取，利用紫色杆菌 体感应抑制活性进行筛选和检测。结果发现，海藻的醇提多酚对细菌群体感应有 较高的抑制活性。然后利用醇提法对25种海藻的多酚进行提取，并研究了海藻 多酚的群体感应抑制活性，发现其中12种海藻中的多酚对细菌群体感应具有抑 制作用。以细菌群体感应抑制活性为指标，选取了石莼、马尾藻和裙带菜三种海 藻中的多酚进行了进一步研究。结果表明：这三种海藻多酚对紫色杆菌紫色菌素 的产生均具有抑制作用，并表现出对浓度的高度依赖性，当多酚浓度在0．1．O．5 mg／mL范围时，能够影响紫色杆菌CV026紫色菌素的产生但不影响其生长。 2．海藻多酚QSI特性及其化学组分测定 采用紫外可见分光光度计和红外光谱仪对石莼、马尾藻和裙带菜多酚进行扫 描，分析初步结构，并通过HPLC进一步测定三种海藻多酚的化学组分及含量。 分析表明：石莼、马尾藻、裙带菜多酚与没食子酸、儿茶酚标准品在28011IIl附 近有类似的吸收峰，表明三种海藻多酚含有类似于没食子酸、儿茶酚的苯环结构。 石莼、马尾藻、裙带菜多酚与没食子酸、儿茶酚、间苯三酚的红外吸收谱图也具 有相似之处，都具有明显的酚羟基伸缩振动、芳香环骨架伸缩振动及在指纹区的 特征吸收峰等。初步推断所筛选海藻多酚QSI具有没食子酸、儿茶酚或间苯三 酚相似的结构。三种海藻多酚的化学组成虽然具有较大差异，但都含有表儿茶素 及儿茶酚，且以儿茶酚含量最高。 3．海藻多酚Qsl对大菱鲆腐败变质及其腐败菌群体感应调控初探 用浓度为O．5mg／mL的三种海藻多酚Qsl对大菱鲆进行处理，4℃贮藏，定 期进行感官评定、菌落总数、挥发性盐基氮、pH值等腐败指标的测定。通过涂 平板法用CV026紫色杆菌检测体系测定不同贮藏时期的大菱鲆鱼肉菌落及其群 体感应现象。结果表明：大菱鲆的菌落总数、pH值、挥发性盐基氮(TVB—N) 均随着贮藏时间的延长而增长，这与感官评定的结果相吻合。海藻多酚QSI处 理的样品菌落总数增长速度均明显低于对照组(尸O．05)，其中石莼多酚处理组 菌落总数增长速度最慢，裙带菜多酚对大菱鲆细菌总数的调控作用最差，但仍然 好十对照组。在大菱鲆的贮藏期间，对照组在腐败后期出现了一定的紫色现象， 表明有群体感应信号分子的产生，其它处理组均没有出现紫色现象，而对新鲜的 大菱鲆总体细菌的群体感应检测时，对照组与处理组均没有出现紫色现象。推测 大菱鲆在4℃贮藏过程中，具有群体感应现象的菌株在不断增多，而海藻多酚 OSI对有群体感性现象的菌株具有调控作用。 关键词：群体感应抑制剂；海藻多酚；大菱鲆；腐败变质；调控 A reI i mi r r r onofthe i I p na esearchon ati spo y egu age seaweedl I s of＆9p办亡办a／／77“s，7增x／／7wsby poyphenoquorum sensi ngi nhi bi tor(QSI) Abstract Inthis oftheseaweed on bact