酶分子修饰与模拟创新.pptVIP

二硫键的化学修饰 二硫苏糖醇（DTT） （巯基的还原剂） 酰化剂 DTT即DL-Dithiothreitol，为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2，分子量为154.25。常用还原剂，有抗氧化作用。DTT和巯基乙醇相比，作用相似，但DTT的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时，两者效果相近。但DTT价格略高一些。 氨基的化学修饰 三硝基苯磺酸（TNBS） 琥珀酸酐 DNFB 丹磺酰氯(DNS) 修饰剂使酶分子侧链上的氨基发生改变，从而改变酶蛋白的空间构象的方法。 羧基的化学修饰 碳二亚胺 修饰剂与酶蛋白侧链的羧基进行酯化、酰基化等反应。 应用比较多的修饰方法（I） 1）. 酶的表面化学修饰 (1). 大分子修饰：可溶性大分子，其中相对分子量在500-20000u范围内的PEG（聚乙二醇）类修饰剂应用最广，既能溶于水，又可以溶于大多数的有机溶剂，它一般没有免疫原性和毒性。化学修饰时多采用单甲氧基聚乙二醇（MPEG)。 PEG的分子式： OH-CH2-(CH2-O-CH2)n-CH2-OH 特点：分子线性；具有较好的生物相容性；在体内部残留，无毒性和抗原性。 利用PEG修饰酶的显著特点是：能消除酶的抗原性。 （1）琥珀酸酐法 活化反应在碱性条件下进行，产物与酶分子上-NH2产生交联反应。 a. PEG活化反