酶法生产壳寡糖其质量控制研究.pdfVIP

摘要 摘要 壳寡糖是一种具有独特生理活性的低聚糖，在食品、医药、农业和环保等领域有着 广泛的应用价值。酶法制备壳寡糖是一种理想的制备方法，但目前酶法制备壳寡糖的底 物浓度普遍较低，一般不超过 5%，这使得酶解、分离纯化、浓缩以及干燥的成本较高， 影响了壳寡糖酶法生产的工业化。为此，本论文研究了高底物浓度条件下生产壳寡糖的 工艺，对酶法生产壳寡糖具有一定的理论和现实意义。主要研究内容如下： 为了提高酶解体系中底物的浓度，采用高剪切分散机对壳聚糖进行了促溶和增溶处 理，将底物浓度提高到了 10%以上，降低了壳寡糖酶法生产的能耗水平和生产成本。通 过考察温度、pH 、酶的添加量、酶解时间及底物浓度对酶解的影响，确定了高底物浓度 条件下酶法制备壳寡糖的最适条件：温度 45 ℃，pH4.5 ，酶的最适添加量 8U/g，底物浓 度10% ，酶解时间 6h 。 研究了高物料浓度条件下壳寡糖的分离纯化，采用截留分子量 10kDa 的超滤膜对壳 寡糖进行分级，得到了最适的操作参数：操作压力 0.25MPa～0.3MPa，操作温度室温， 料液固形物含量 5%～10%。通过静态吸附试验和动态吸附试验，研究了 717 阴离子交 换树脂的脱酸工艺，结果表明：717 阴离子交换树脂能迅速脱除酶解液中的残留醋酸， 并有一定的脱色作用，脱色率达 47.4% ，动态吸附试验的最适上样流速为 2BV/h ，上样 量 8BV 时吸附出现泄漏。 优化了壳寡糖的喷雾干燥工艺，并将喷雾干燥与冷冻干燥、真空干燥和热风干燥进 行了比较。喷雾干燥的最佳工艺参数为：固形物含量 25%～30%，进风温度 180℃，进 料速度 55mL/min 。喷雾干燥产品的色泽、溶解性、还原糖、总糖、游离氨基含量和抗 氧化活性等各项指标均较接近冷冻干燥，但能耗远低于冷冻干燥，较适合工业化生产。 进行了 20L 规模的放大实验，结果表明：产品得率达 66.5%，比低浓度条件下的制 备工艺提高了 16%以上，产品的质量较好。将酶法和化学法制备的壳寡糖的还原性、氨 基含量、抑菌性和化学结构等方面进行了比较，结果表明：酶法制备的壳寡糖的各项指 标均优于化学方法。提出了酶法制备的壳寡糖的质量标准，并将还原糖、游离氨基和单 糖含量作为其关键技术指标。 关键词：壳寡糖；高剪切分散机；酶解；超滤；脱酸；干燥方式 I Abstract Abstract Chitooligosaccharides (COS) is a kind of oligosaccharides with many unique biological activities. It has great application prospects in food, medicine, agriculture and environmental protection areas. Preparation of COS by enzymatic hydrolysis is an ideal preparation method. But the substrate concentration in enzymatic hydrolysis is generally low, usually no more than 5%. It leads to the high cost in hydrolysis, purification, concentration, and drying. In this paper, a new technology of preparation of COS by enzymatic hydrolysis under high substrate concentration was studied. The main contents are as follows: Chitosan was pretreated by high-shear dispersion device w