草莓再生体系的化及转JERFlt;,33gt;基因提高其抗病性的研究.pdfVIP

摘要 草莓是一种重要的多年生常绿草本植物，其果实味道鲜美，营养丰富，经 济价值高，既可用于鲜食，又可用于加工，深受人们的喜爱。但由于各种病害 的危害，草莓的产量和品质受到严重的影响。因此提高其抗病性对草莓生产具 有重要的实际意义。草莓转基因已有成功的报导。 通过转基因的手段来增强植物的抗病性是一种行之有效的方法，转入特定 的病程相关基因(PR基因)能增强植物对某种或某几种特定病害的抵抗能办， 但要获得多抗、高抗的品种，就必须同时转入多个基因，就目前技术而言是难 以做到的。导入调节抗逆基因表达的转录因子基因可能对全面增强作物抗逆性 提供了一种全新的途径。 本研究主要以丰香、章姬为试材，对再生体系进行了优化，在此基础上， 利用农杆菌介导法将转录因子基因JERF刀基因导入草莓中。对抗性植株进行 PCR、DNA点杂交检测，获得了转基因草莓植株。对转基因植株接种炭疽病试 验发现，其抗炭疽病能力显著增强。 本试验获得的主要结果如下： 1．建立了丰香、章姬的叶片高效再生体系，其再生率均达到100％，其中 为3．5个，章姬最适培养基配方为1／2MS+2，4-D0．07 mg／L+TDZ4．0mg／L，平 均再生芽数目达到4．6个。 2．草莓叶片外植体进行一个星期的暗培养有利于其不定芽再生率的提高。 3．对章姬草莓叶片进行转基因，经过Km筛选再生出的植株进行PCR检 测，其阳性率为5．4％：对PCR检测的阳性株进行DNA斑点杂交，其阳性率为 66．7％。证明本研究已成功地将JERF33基因导入章姬草莓中。 4．对转JERF33基因草莓叶片进行针刺法接种炭疽病，结果表明转基因株 与对照株相比其抗性显著增强。 关键词：草莓再生体系遗传转化3E,fF33基因抗病性 Abstract isoneofthemost and moundtheworldfor important SWawberry popularcrops its and delicioustaste、richnutrientandeconomic has ale affected itsresistance qualitygreatly bypathogenattack,althoughimproving been a time．ItislaboriousandslowtOcreateanewealtivarwith studiedforlong resistanceand and transfer single lli曲一multi highyieldqualitythrough PR(plathogen encoding factorinto plants related)gene．Sotransferringgene uanscriptioncrop anew to with PR mayprovide approachimprovingcropplants gene enhance、d diseaseresistance． and expr