遗传学实验(生物科学专业)-上饶师范学院生命科学学院.docVIP

上饶师范学院自编实验讲义 遗 传 学 实 验 （第一版） 邓接楼 主编 上饶师范学院生命科学系 2005年9月 目　录实验一 蚕豆根尖的有丝分裂……………………………………2 实验二 减数分裂…………………………………………………实验三 果蝇唾腺染色体的观察…………………………………实验四 果蝇单因子杂交试验……………………………………实验五 果蝇的形态观察和生活史………………………………实验六 果蝇的伴性遗传…………………………………………实验七 植物多倍休的诱发及鉴定………………………………1实验植物有性杂交……………………………………………1 实验一、蚕豆根尖的有丝分裂一实验目的学习对植物组织细胞的固定解离压片方法观察有丝分裂各时期的动态变化二实验原理生长旺盛的根尖分生组织中有正在进行分裂的细胞，经过取材。压片。等处理，在显微镜下可看到染色体在各时期的形态。结构和数目。 三、实验材料蚕豆2n=12。 四、实验仪器和药品 小剪刀，镊子，盖玻片，载玻片，刀片，平底指管，培养皿，显微镜，酒精灯，吸水纸，铅笔，画图纸等。 卡诺氏固定夜(无水乙醇：醋酸=3：1)。0。1%秋水仙素溶液。解离液(95%乙醇和浓盐酸等量混合)。石碳酸品红的配制：称取03克碱性品红溶于10ml70%乙醇中，然后加入90ml 5%的石碳酸水溶液，再加11ml冰醋酸和11ml 37%的甲醛即成染色有染色液。为提高染色液效果，取此染色液10ml，加入90ml45%醋酸和18克山犁醇即可。 五、实验步骤取材发芽的蚕豆种子，当胚根长到12cm时，用水冲洗干净，切取0。51cm长的根尖备用。 2．预处理将材料浸入01%秋水仙素溶液中，在室温下处理2—4小时。由于秋水仙素能阻断纺锤体的形成，可获得较多的中期分裂相。 染色体缩短变粗，容易观察。 3．固定固定的作用是用化学药物迅速杀死细胞，保持结构不变，其方法是把经过预处理的根尖，放入盛有卡诺氏固定夜的平底指管中，盖上小塞子，在室温下固定224小时。如果预处理后，马上进行观察，则可省略此步骤，直接按4步骤处理。 4．解离盐酸乙醇混合液既有固定作用，也有解离作用。 解离的作用是除去细胞间的果胶层，并使细胞壁软化。细胞分散便于观察。 解离的时间依材料而定， 在室温条件下，约712分钟，如蚕豆10分钟即可。 5．染色压片将解离的材料用蒸馏水冲洗后置于载玻片上，用刀片切取根冠及伸长区，只留12cm分生区。滴加一滴石碳酸品红染色液， 染色几分钟。接着用镊子将分筛组织分割成若干小块，分散放置。随后加上盖玻片，在酒精灯上微烤34次，切忌将材料煮沸。在盖玻片上面履以吸水纸，以大拇指用力下压， 将材料压成薄薄一层，在显微镜下检查。若染色体分散的不够理想，可用铅笔带橡皮的一头轻轻敲打，以促进染色体分散。 6．镜检在显微镜下，选择分裂清晰的细胞进行观察。 六、作业绘制你所看到的图像，并说明是有丝分裂的哪一期。 实验二、减数分裂一、实验原理植物花粉形成过程中，花药内的某些细胞分化成小孢子母细胞（2n）。每个小孢子母细胞进行二次连续的细胞分裂，第一次减数分裂和第二次减数分裂（每次分裂都分为几个时期，用前期I，中期I，后期I，末期I，前期II，中期II，后期II，末期II表示）。每一小孢子母细胞经减数分裂后，产生四个细胞，第个细胞就是一个单核花粉（即小孢子）。这时，小孢子内细胞核的染色体数目已减一半，成为单倍体（n）。在适当的时机采集植物的花蕾，经固定液固定后进行压片，染色，就可以在显微镜下观察到小孢子母细胞形成花粉粒时的减数分裂过程。 在动物的有性生殖过程中，也有一个由双倍体到单倍体的减数分裂过程；动物的精巢分化出精母细胞，精母细胞减数分裂，形成单倍染色体的精子。 对小孢子母细胞及精母细胞分裂过程的观察，可用来了解动物和植物的生殖细胞的形成过程，进行染色体组型分析，以及分析各种不育的染色体原因等。 二、实验目的了解植物花粉，动物精子形成中的减数分裂过程，并掌握压片、染色、封片技术。 三、实验材料蚕豆花蕾。 四、实验准备： 1．用具 五寸钟表镊子，眼科镊子，解剖针，盖玻片，大培养皿，小培养皿，立式染缸，染色板，酒精灯，量筒100毫升、10毫升。 2．所需药品及配制 无水乙醇，二甲苯，加拿大树胶，醋酸洋红。 五、实验步骤： 采集刚现蕾的花序置于固定液内固定3小时后，换入70%的酒精中。若保存时间较久，可放在70%酒精一份，甘油一份的溶液中。 取已固定好的花穗，按其花蕾大小，排列在小培养皿中。 剥开花蕾（先取中等大小的花蕾）取出花药，放在载玻片上。 加一滴醋酸洋红在花药上。 用解剖针轻轻剥开花药，可在酒精灯上微微加热（切记，不可烧干）。 加上盖玻片，再把片子放在毛边纸下，用拇指适力压下，使材料分开，并把同围的染色液吸干。