药物分离纯化技术---制备色谱分离技术..pptVIP

分离科学中的热力学 分离科学中的热力学 常规柱色谱的操作 (1)装柱：干法和湿法； (2)上样：液体上样和拌样上样，样品带尽可能窄； (3)洗脱：始终保持洗脱剂液面高于柱床表面，可梯度洗脱； (4)流分收集：常采用固定体积收集法，结合TLC检验； (5)样品回收：减压蒸馏或重结晶 制备色谱技术 干柱柱色谱 干吸附剂，待分离样品配成浓溶液或吸附于少量填料上上样，洗脱液接近色谱柱底部时停止洗脱，挖出或切开色带。 制备色谱技术 时间短 节省试剂 玻璃柱 尼龙柱 减压柱色谱 减压促进溶剂流动。 制备色谱技术 与加压相比，变换溶剂更加方便； 吸附剂高度一般不超过5cm； 分离过程中，逐渐增加洗脱剂中高极性溶剂的比例，开始阶段增加幅度较小(1%,2%,3%)，随后幅度逐步增大(5%,10%,20%等)，通常收集20-25个流分即可将所有成分洗脱。 制备色谱技术 加压液相柱色谱技术 (1)快速色谱法：约0.2MPa； (2)低压液相色谱法：0.5MPa； (3)中压液相色谱法：0.5～2MPa； (4)高压液相色谱法：2MPa； 制备色谱技术 加压液相色谱制备分离方法的建立： (1)采用薄层色谱确定分离条件。 对于快速和低压色谱，常用薄层色谱选择分离条件。 硅胶薄层色谱确定正相色谱条件，反相硅胶薄层色谱确定反相色谱条件，一般选择Rf不大于0.3且具有