VEGF-ASODN转染对胃癌细胞VEGF表达及生长的抑制作用.pdfVIP

维普资讯 中国普外基础与临床杂志 2008年 5月第 15卷第 5期 ChinJBasesClinGeneralSurg，Vo1．15，No．5，May2008 ·347 · 【文章编号】1007—9424(2008)05—0347—05 基础与实验研究 VEGF—ASODN转染对 胃癌细胞 VEGF表达及生长的抑制作用 郑 斌 段体德 左 铁 【摘要】 目的 研究血管内皮细胞生长 因子(VEGF)一反义寡核苷酸 (ASODN)转染 胃癌细胞 SGC-7901对其 VEGF表达和生长的抑制作用。方法 人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN，转染 胃癌细胞 SGC-7901，24h后实 时荧光定量 RT—PCR检测细胞 VEGFmRNA起始拷贝数 ，ElISA法检测细胞及培养液上清 中VEGF蛋 白含量 ， Westernblot法检测细胞生存素(survivin)蛋 白含量 ，流式细胞仪检测细胞凋亡情况 ，用 MTT实验检测转染对细胞 活性 的影 响，用细胞生长 曲线表示转染对细胞生长 的影 响。结果 VEGF-ASODN 能显著 降低 VEGFmRNA 水 平 、降低 胃癌细胞及其培养液 中VEGF蛋 白含量、降低 survivin蛋 白含量、增加细胞凋亡、抑制细胞活性及生长 (PO．05)。结论 VEGF_AS0DN转染 胃癌细胞 SGC-7901能显著抑制 VEGF和 survivin蛋 白表达 、增加细胞凋 亡 、抑制细胞生长 。 【关键词】 血管 内皮细胞生长 因子 反义寡核苷酸 转染 胃癌细胞 表达 【中图分类号】R735．2 【文献标识码】A SuppressionofVEGF-ASODN onExpressionofVEGF andGrowth inGastricCancerCells ZHENGBin ，DUAN Ti一 。 ， ZUOTie．1．DepartmentofMammaryGland，Yah’anHospital，Kunming650051，China；2．Department ofHepatobiliary，TheF fAffiliatedHospitalofKunmingMedicalCollege．Kunming650032，China Corrs户。 gAuthor：ZHENGBin，E-mail：zhengbinkm@ 163．corn [Abstract】 Objective ToobservetheeffectsofvascularendothelialgrowthfactorantisenseoligonucIeotide (VEGF-ASODN)onexpressionofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)and growth in gastriccancercells． Methods The VEGF-ASODN was synthesized artificially with phosphorothioic acid． Aftertransfecting with VEGF-ASODN ingastriccancercellsSGC-7901．theinitialcopynumberofmRNA wasdetectedbyreal—timeRT_ PCR，andthequantityofVEGFproteininbothcellandsupernatantweredetectedbyElISA．Thelevelsofexpres— sionofsurvivinproteinincellsweremeasuredbyW esternblot．FCM andMTT methodw