牛粪堆肥对总石烃的降解效果及微生物性质研究.pdfVIP

摘要 摘要 石油类污染物在环境中的积累数量日益增多，对人体健康和整个生态系统 的安全都构成了很大的潜在威胁。生物修复法具有成本低、无二次污染等优点， 正逐渐成为一种安全有效的石油污染修复技术。生物修复主要是利用微生物共 代谢作用将原油转化为毒性较小的化合物，而堆肥过程中的微生物具有很高的 活性，所以采用堆肥技术降解石油污染物具有巨大的发展潜力。 在堆肥原料牛粪中加入不同浓度的石油(0、1％、5％和10％)进行不同温 。度下(20℃和50℃)的堆肥是本文的特点。通过定期取样测定污染物浓度和 生物指标，一方面可以研究堆肥过程中微生物共代谢作用在不同温度下对总石 油烃的降解效果，包括饱和烃、芳香烃、极性物和多环芳烃等的含量变化；另 一方面通过菌落数、酶活性和微生物多样性的变化情况，可以比较不同原油浓 度对微生物的毒性大小，筛选出降解效果优秀的石油降解菌。主要研究结果有： (1)研究了总石油烃萃取方法的各种影响因素，通过正交试验，得到总石 油烃超声．索氏萃取重量法的最佳条件为：超声功率60W，超声10min，样品： 萃取剂=1：25，萃取6h； (2)堆肥过程中，除了10％浓度石油堆肥处理外，其它处理的pH值在堆 肥后都有所降低；初期堆料的碳氮比在25～35之间，且随堆肥时间逐步降低， 末期都在20以下，说明堆肥基本达到腐熟： (3)总石油烃含量有不同程度的降低，最高降解率是1％石油浓度堆肥处 理的(42．21+1．60)％；饱和烃含量下降，而芳香烃和极性物却是先增大后减小， 三环、四环和五环多环芳烃的含量都有所降低； (4)酶活性方面，由于随温度升高微生物数量减少，过氧化氢酶活性和多 酚氧化酶活性都是开始前7天下降，之后开始上升；但由于石油烃的刺激作用， 脱氢酶活性的表现却是先升高再降低，而这三种酶都会促进石油烃的降解； (5)变性梯度凝胶电泳分析表明50℃堆肥后微生物多样性会增大，即堆 肥有助于微生物群落的稳定，而原油的生物毒性对菌群具有选择作用，更多地 表现出对微生物多样性的抑制； (6)通过反复分离纯化得到六株不同形态的优势菌，降解实验结果表明， 六株降解菌都显著地降低了土壤中的总石油烃含量，降解率最高为菌M4(64．18 摘要 ±4．88)％，最低是菌M3(26．334-2．15)％，可用于石油污染土壤的修复； (7)大港油田现场修复工作表明，细菌．真菌联合菌剂与植物搭配对石油污 染土壤具有良好的修复效果，5个月的最高石油去除率达到(75．7±4．16)％， PAHs的总量也有明显下降，最高去除率为82．75％。 由实验结果可以看出，合理调控堆肥因子，利用堆肥中微生物的共代谢作 用可以达到降解石油的目的，而且效果显著。 关键词：总石油烃堆肥变性梯度凝胶电泳酶活性石油降解菌 H Abstract Abstract Theaccumulation of contaminationinthe quantitypetroleumhydrocarbon environmentincreases andhasbeenaserious threattothe daybyday potential humanhealthand has allsafe become ecosystemsecurity．Bioremediation