32株瘤胃纤维解细菌的分离鉴定与保藏研究.pdfVIP

摘 要 反刍动物对粗纤维的降解能力为业界所瞩目，这一功劳又不得不归功于瘤胃，而瘤 胃对粗纤维的降解主要靠瘤胃纤维降解细菌完成，所以研究瘤胃纤维降解细菌就成为提 高反刍动物对秸秆利用率的必经之路。本试验从瘤胃中分离到纯化的瘤胃纤维降解细 菌，并对其进行了鉴定和保藏等实验研究，结果如下： 1．比较了3种培养基和2种厌氧方法分离瘤胃纤维降解细菌的效果，最终选用分离 效果较好的培养基C和Hungate滚管法分别作为分离培养基和厌氧培养方法。 2，测定32株纤维降解菌的葡萄糖苷酶活、CMC酶活、滤纸酶活的游离酶和附着酶， l-t lI u 平均值分别为13．561ag／ml·mill、5．22g／rra·min、0．15g／ml·min；15．32g／ml-min、 6．4411 11 g／m1．min、0．23g／ml-min。3种酶附着酶都显著高于游离酶，说明纤维降解细菌 的细胞膜上附着有大量纤维素酶。 3．运用本试验建立的方法从绵羊瘤胃内容物中分离得到瘤胃厌氧细菌32株，经鉴 定其中弧菌6株、球菌20株、梭杆菌3株、拟杆菌3株。经鉴定6株弧菌全部为丁酸 弧菌属(BuOnqvibrio)的溶纤维丁酸弧菌(BuO,rivibrio 为胃八叠球菌(Sarcina flavefaciens)，4株为伶俐瘤胃球菌(Ruminococcuscallidus)，其余5株未鉴定到种。3株 拟杆菌全部为拟杆菌属的琥珀酸拟杆菌(Fibrobactersuccinogens)。3株梭杆菌全部为梭茵 属的多聚糖分解梭菌(ClostridiumPolysaccharolyticum)。 4．保藏实验发现瘤胃厌氧菌在保存180d内，10％甘油液体保存一20℃最佳，360d 内--20℃、一70℃均可。360d以上液氮保存最好。 关键词：纤维降解菌；纤维素酶；分离鉴定；菌种保藏 Preservationof32 Researchon Identificationand Separation Strainrumen Bacteria Cellulolytic Abstract For isfocusedthatruminantcall crudefibre manyyears，it degrade effectively． offibreowetorBmen．Infactrtmlen bacteriaa cellulolytic very Degradation plays roleonthe ofcrudefibre．Asa of result，To availability importam degradation improve ruminanttocrude is to rwllen bacteria．In fibre，itnecessarystudy cellulolytic the咖dy，32 gtrainsrunlen bacteriaareselectedfora the celhilolytic long-termpreservation．By