4℃冷藏小鼠附精子与ops法冷冻卵母细胞体外受精能力的研究.pdfVIP

中文摘要 本实验土要目的是探索不同方法低温(4C)冷藏的小鼠附睾精子与新鲜／OPS法冷冻·解冻 的卵母细胞的体外受精能力，井进行卵母细胞透明带打孔米提高体外受精率，通过胚胎移植及体 外培养检验胚胎的体内、外发育能力。 母细胞体外受精的能力。结果表明．处理组与对照组在}细胞率、桑椹胚奉、囊胚率均有显著性 筹异(P0，05)。比较两种冷藏方法，屏体冷藏1、2天的精子与卵母细胞受精后囊胚率 然而。对丁冷藏3、4大的精子，混合气法处理的精子同卵母细胞受精后在卵裂率(41．41％vs16．22％； 25．97％vs 5．00％)均离丁-屏体法同等处理 15．83％)及囊胚发育率(21．21％vs13．51％：14．92％VS 组，且有显并性差异(P0．05)。 由丁I混合气法在第3、4大保存精子的效果优于屠体法，故实验二、三、四处理组均采用混 合气法保存的精于。实验二表明卵母细胞透明带打孑L技术能够提高活力较弱精子与新鲜卵母细胞 的体外受精能力。结果表明，冷藏1、2天的附睾精子与卵母细胞(zD)的受精率(91．19％， 而且．冷藏大数(1-4)相同的精子．卵母细胞透明带打孔处理纽同非打孔组相比，其体外受精率 都是前者高丁后者(P0．05)。 实验三探讨冷藏精子与冷冻卵母细胞的体外受精能力。利_}I；JOPS法玻璃化冷冻保存小鼠卵母 细胞，解冻扁其形态正常率为85％左右。若直接与新鲜的精子进行体外受精，受精率相对较低 (46．67％)，但通过对卵透明带打孔后受精率可以人人提高(84。73％)。即使是冷藏l～3的糖子与 冻卵母细胞透明带进行打孔，冷藏1、2天的精于与卵母细胞的受精率(79．58，80．80％)与新鲜 精于纽的受精率(84-．73％)筹异不显著(P0．05)。但对于冷冻／解冻卵母细胞，无论透明带打孔 处理与否，体外受精J亓的囊胚发育率均低丁．新鲜卵母细胞处理组(P0．01)。 实验四对上述部分处理组2一细胞胚胎进行移植。检验胚胎在体内的发育。结果表明：新鲜精 于与新鲜卵母细胞(zD／zI)受精后2．细胞移植，产仔率分别为46．30％雨150．00％，且著异不显 著(P0．05)：新鲜和l解冻卵母细胞透明带打孔J亓与新鲜精子受精，2．细胞移植后产仔率分j；}l为 46．30％和16．44％，若异极显并(P0．01)：新鲜卵母细胞打孔后分别与新鲜精子与冷藏两犬精子 受精，2一细胞移植产仔率分别为46．30％$121．43％，且有显著性差异(P0．05)。以上各组囊胚细 胞数均无显并性差异(P0．05)。 芙键词：冷藏精于，卵母细胞冷冻，透明带打孔，体外受精．鼠 Abstract unfrozenat4Cand The ofinvitro mouse Sperm oocytes capability fertilization(IVF)between was therateoffertilizationwas investigated，and Openpulledstraw(OPS)Method cryopreservedby in Zofla-drilledwith developmentvivo(vitro) improvedby piezomicromanipulation．Moreover,embryos whole wasdividedintofour wastest andcullureinvitro．The parts： tran