pedv s和il-18联合dna疫苗免疫效果研究.pdfVIP

摘要 手两 要 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以严重的呕吐、脱水和腹泻 为主要特征的猪的一种急性高度接触性肠道传染病。该病的流行给养猪业带来了巨大的损失。 目前，虽然商品化PEDV疫苗已广泛使用，但该病在我国仍有流行。因此，研制安全有效的 PEDV疫苗仍然是防治该病的重要研究方向。 S蛋白是PEDV的重要结构蛋白，能诱导机体产生中和抗体，是研究PEDV基因工程苗 S、PEDV 的主要候选基因。本实验分别将PEDV S1与猪IL．18基因亚克隆到pVAXl真核表 达载体中，构建了3种重组真核表达质粒pVAXl．PEDVS、pVAXl．PEDVS1和pVAXl．pIL-18。 通过脂质体转染法将3个重组质粒转入BHK-21细胞中进行表达，试验结果表明，这3个基 因都可以在体外进行表达，且表达的蛋白可以被PEDV和plL-18多克隆抗体所检测。 本试验利用小鼠为实验模型，共分成7个组，分别为pVAXl．PEDVS组、pVAXl-PEDV S1组、pVAXl．plL．18组、pVAXl．PEDV 组以及pVAXl组。利用淋巴细胞增殖试验、酶联免疫吸附试验等方法对不同处理组小鼠的 各项免疫指标进行了检测。 试验结果表明，PEDVS组和联合免疫组多数免疫指标都高于PEDVSl组，其中以联合 免疫组免疫效果尤为突出。具体表现为：T淋巴细胞增殖功能，外周血中抗PEDV特异性抗 S1组比较都 体水平以及IFN吖、IL-4的表达量，脾脏及外周血T淋巴细胞毒性作用与PEDV 有明显的提高。 S抗原基因分子佐剂具有免疫增强作用。为进一步研 综上所述，plL-18基因作为PEDV 究pIL-18生物活性提供了数据，同时为新型免疫增强型抗PEDV疫苗研究提供了理论基础。 关键词猪流行性腹泻病毒；PEDVS基因；猪白细胞介素18；免疫佐剂 Abstract Re DN In： Induced’DNInduce AMVacclnetccine Bearing Kesponses0y 15earing GeneofPEDVCombinedwithPIL．18 ． Abstract Porcine diarrhea an diarrhea(PED)causedbyporcineepidemic virus(PEDV)is epidemic entericdiaeaseofswine．Its hasresultedin economiclossesin contagious prevailence heavy hi曲ly swine thevaccineforPEDVhadbeen still commercialized，it industry．Although causingepidemic in aneffectivevaccineisall researchfor of China．Thus，developing important topicprevention PEDVinfection．