pcv2 or2基因真核表达质粒的构建及与猪il-15联合免疫效果研究.pdf

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pcv2 or2基因真核表达质粒的构建及与猪il-15联合免疫效果研究

目 录 目 录 中文摘要…………………………………………………………………………………………………I 英文摘要………………………………………………………………………………………………。II 1.前言……………………………………………………………………………………………………1 1.1猪圆环病毒感染…………………………………………………………………………………l 1.1.1病原…………………………………………………………………………………………。1 1.1.2流行病学…………………………………………………………………………………….3 1.1-3临诊症状及病理变化……………………………………………………………………….3 1.2PCV2疫苗的研究进展………………………………………………………………………….4 1.2.1PCV2传统疫苗……………………………………………………………………………..4 1.2.2 PCV2新型疫苗……………………………………………………………………………。5 1.3IL.15的研究进展………………………………………………………………………………..6 1.3.1IL.15简介……………………………………………………………………………………6 1.3.2 IL.15对T细胞的影响……………………………………………………………………..6 1.3.3IL.15对NK细胞的影响……………………………………………………………………6 1.3.4 IL.15对B细胞的影响……………………………………………………………………..6 1.3.5 IL.15在疫苗研究中的作用………………………………………………………………。6 1.4研究目的与意义…………………………………………………………………………………7 2.材料和方法……………………………………………………………………………………………8 2.1实验材料………………………………………………………………………………………….8 2.1.1质粒、菌株、毒株与细胞…………………………………………………………………8 2.1.2实验动物…………………………………………………………………………………….8 2.1.3主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒…………………………………………………8 2.1.4主要生化试剂……………………………………………………………………………….8 2.1.5主要仪器设备……………………………………………………………………………….9 2.2实验方法………………………………………………………………………………………….9 2.2.1PCV2 ORF2基因的原核表达质粒以及真核表达质粒的构建………………………….9 2.2.2重组蛋白的诱导表达以及抗原性质鉴定……………………………………………….12 2.2.3PCV2多克隆抗体的制各………………………………………………………………….13 2.2.6数据处理……………………………………………………………………………………20 3.实验结果……………………………………………………………………………………………。21 3.1PCV2多克隆抗体制备…………………………………………………………………………21 3.1.1PCV2 ORF2基因编码Cap蛋白的原核表达……………………………………………21 3.1.2表达蛋白的纯化……………………………………………………………………………22 i 东北农业大学农学硕士学位论文 3.1_3多克隆抗体检测……………………………………………………………………………23 3.2PCV2核酸疫苗构建……………………………………………………………………………25 3.4体液免疫应答检测……………………………………………………………………………一26 3.4.1PCV2抗体检测…………………………………

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