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pcv2 or2基因真核表达质粒的构建及与猪il-15联合免疫效果研究
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中文摘要…………………………………………………………………………………………………I
英文摘要………………………………………………………………………………………………。II
1.前言……………………………………………………………………………………………………1
1.1猪圆环病毒感染…………………………………………………………………………………l
1.1.1病原…………………………………………………………………………………………。1
1.1.2流行病学…………………………………………………………………………………….3
1.1-3临诊症状及病理变化……………………………………………………………………….3
1.2PCV2疫苗的研究进展………………………………………………………………………….4
1.2.1PCV2传统疫苗……………………………………………………………………………..4
1.2.2
PCV2新型疫苗……………………………………………………………………………。5
1.3IL.15的研究进展………………………………………………………………………………..6
1.3.1IL.15简介……………………………………………………………………………………6
1.3.2
IL.15对T细胞的影响……………………………………………………………………..6
1.3.3IL.15对NK细胞的影响……………………………………………………………………6
1.3.4
IL.15对B细胞的影响……………………………………………………………………..6
1.3.5
IL.15在疫苗研究中的作用………………………………………………………………。6
1.4研究目的与意义…………………………………………………………………………………7
2.材料和方法……………………………………………………………………………………………8
2.1实验材料………………………………………………………………………………………….8
2.1.1质粒、菌株、毒株与细胞…………………………………………………………………8
2.1.2实验动物…………………………………………………………………………………….8
2.1.3主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒…………………………………………………8
2.1.4主要生化试剂……………………………………………………………………………….8
2.1.5主要仪器设备……………………………………………………………………………….9
2.2实验方法………………………………………………………………………………………….9
2.2.1PCV2
ORF2基因的原核表达质粒以及真核表达质粒的构建………………………….9
2.2.2重组蛋白的诱导表达以及抗原性质鉴定……………………………………………….12
2.2.3PCV2多克隆抗体的制各………………………………………………………………….13
2.2.6数据处理……………………………………………………………………………………20
3.实验结果……………………………………………………………………………………………。21
3.1PCV2多克隆抗体制备…………………………………………………………………………21
3.1.1PCV2
ORF2基因编码Cap蛋白的原核表达……………………………………………21
3.1.2表达蛋白的纯化……………………………………………………………………………22
i
东北农业大学农学硕士学位论文
3.1_3多克隆抗体检测……………………………………………………………………………23
3.2PCV2核酸疫苗构建……………………………………………………………………………25
3.4体液免疫应答检测……………………………………………………………………………一26
3.4.1PCV2抗体检测…………………………………
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