动物源性食品重致病菌的调查及多重pcr检测方法的建立.pdfVIP

动物源性食品重要致病菌的调查 及多重PCR检测方法的建立 摘要 沙门氏菌(勋砌D，2P砌卿)、单核细胞增生李斯特菌(三括纪r勋 0157：H7) 聊D聆Dcy幻办明钌)、大肠杆菌0157：H7(E，c办er记办杨cD，f 和空肠弯曲杆菌(∞咖6口c幼埘“疗f)，是引起人动物源性食物中 毒最常见病原菌。此四种病原菌在自然界中广泛存在，同时也是畜禽 体内的共生菌。本课题研究目的：1、建立能够快速检测动物源性食 品中这四种病原菌的多重PCR方法；2、参照国标法，结合建立的多 重PCR检测方法对广西南宁市售新鲜动物源性食品中四种病原菌的 污染情况调查；3、对2009．201o年送捡的病禽及市售新鲜动物源性 食品中检出的沙门氏菌进行血清型鉴定，分析动物源性食品检出的沙 门氏菌的可能污染来源。 参考空肠弯曲杆菌、大肠杆菌0157：H7、沙门氏菌和单核细胞 增生李斯特菌的保守序列，设计相应的引物，优化反应条件，建立了 检测此四种病原菌的多重PCR方法。该方法的特异性试验表明，四 对引物只能扩增各自对应的病原菌DNA片段，而对其它非目标病原 菌则无扩增。 2009年至20lO年间采集广西南宁市6个农贸市场及3个超市零 T 售的新鲜动物源性食品(包括牛肉、猪肉、鸡肉、鸭肉、鸡蛋)进行 四种病原菌的检测。结果显示，在总共315份检测样品中，沙门氏菌 对检出沙门氏菌菌株进行的血清型鉴定发现，动物源性食品最 常见的血清型依次为猪霍乱沙门氏菌、德比沙门氏菌‘鸡沙门氏菌、 鼠伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌、鸭沙门氏菌等，而从临床病禽中 检出的最常见血清型依次为鸡沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、爪哇那 沙门氏菌和纽波特沙门氏菌。 本课题研究结果证明，建立的四重PCR检测方法能快速、高效 地检测食源性致病菌，可作为现用国标法的补充。广西南宁市售动物 源性食品致病菌以沙门氏菌污染为主，除动物自身患病为主要的污染 来源之外，还有其他的途径。 关键词： 动物源性食品 食源性致病菌食品污染 多重PCR沙 门氏菌血清型 II THEMAIN INVESTIGATIONoF FooDBoRN ANDDEVELoPMENTOFA PATHoGENS PCRDETECTloNMETHoD MULTIPEX ABSTRACT coli Salmonelln o、5’：瑚． Spp．ListeriamonocytoheneS．EScherichia are foodbome whichcan C白彬咖6臼c纪r／巧“，2f imponant pathogens causefood four areworldwideexistencein poisoning．Thepathogens naturebutalso bacteria．Theofthe animals’symbioticpu叩ose study Establisha PCRmethod、Vhichcan detect including：1 multiple rapidly thefour