实时pcr仪中光检测模块的研制.pdfVIP

摘要 摘 要 自1996年美国PE公司推出世界第一台商品化的荧光定量PCR仪以来，高 性价比和小型化一直是国内外研制实时荧光PCR仪的重要目标，而光电检测模 块的优化是实现这个目标的重要内容。课题着眼于研制小型化的实时荧光PCR 仪光电检测模块，主要研究内容包括光电检测光路设计，光纤和反应池的光学模 拟仿真，光电检测电路系统设计及荧光检测实验分析四部分。 课题首先采用ZEMAX光学设计软件设计了PCR荧光检测光学系统，包括 LED光源与光纤的耦合系统设计、激发光路系统设计、荧光采集透镜设计及检 测光路设计，并对整体光路系统进行了优化、优化后，光纤耦合系统的耦合效率 达到了88．78％，在激发光路中，样品池底接收到的光效率为11．02％，在荧光收 集光路中，对入射光进行滤波处理，荧光能量衰减了1．9％，实现了高效的光学 滤波功能；采用蒙特卡罗方法在MATLAB环境下模拟分析了光子在样品池中的 运动情况，得到样品对入射光子的吸收率为70．7％；设计了LED驱动电路和PMT 光电检测预处理电路，并且设计了PMT的固定装配系统，使光学系统处于一个 封闭的环境中，避免了杂散光干扰，提高了PCR光学系统的信噪比：最后采用 GreenI荧光染料的小牛胸腺DNA样品进行检测，PMT检 PMT对加入了SYBR 测结果表明随着样品浓度的增加，PMT电流输出随之增大，其与PMT增益拟合 曲线的斜率也随之增大。 课题设计了结构紧凑简单、光学效率高的光学系统；采用体积小、价格低的 LED光源减小了光电模块的体积，提高了检测系统的性价比；采用PMT固定装 配系统进行光电检测有效避免了系统中杂散光的干扰，提高了PCR光学系统的 信噪比，初步研制出适用于便携式PCR仪的光电检测模块。 关键词：实时PCR仪；荧光检测；光学设计；光电倍增管 北京T业大学丁学硕1j学业论文 II III 皇皇!曼曼曼!曼曼曼!鼍!曼曼曼曼曼!I．_一 一 一 一—I皇曼曼曼皇曼曼 ABSTRACT world’SfirstcommercializationfluorescencePCR Sincel996。the quantitative thePE in theUnited instrumentwas States， producedby Corporation becomemost forthe andminiaturizationthe high．performance importanttarget in and ofareal．timefluorescencePCRinstrumentdomesticoverseas． development The for detectionmodulebecomesan for optimizationphotoelectric importantaspect t11is focusesonthe ofminiaturized detection target．Thispaper study photoelectric PCRinstrument．