口蹄疫病毒结构白vp1病毒样颗粒构建及免疫研究.pdfVIP

MImlIIIl l|UIIIIIIIM Y2697373 本文是国家自然科学基金项目“o型口蹄疫病毒中和表位 业)科研专项“边境地区动物疫病防控技术体系研究 (201103008)的部分研究成果 (项目编号 课题主持人： 马文戈研究员 (新疆维吾尔自治区畜牧科学院) 万方数据 口蹄疫病毒结构蛋白VPl病毒样颗粒构建及免疫研究 摘要 蹄疫(foot-and-mouth disease,FMO)是一种急性、烈性、高度传染性的病毒病，主要感染牛、羊、猪、 鹿等偶蹄类动物。本病除了直接引起幼畜死亡、减少动物体重和产奶量，还导致全球范围内动物及 动物产品的国际贸易限制，造成严重的经济损失，是对偶蹄动物威胁最大的传染病。目前广泛使用 的全病毒灭活疫苗在应用过程中发现诸多不足，开发新型疫苗来弥补这些不足显得极为迫切。FMDV 结构蛋白VPl上存在重要的B细胞和T细胞表位参与构成主要抗原位点。故本研究构建了基于VPl 的融合蛋白病毒样颗粒(ⅥjPs)，来研究该融合VLPs的组装情况及免疫效果。 本研究根据FMDVAsiaI／JS／C叫05序列和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行株BVDVJZ05．1 列。全基因长988 的枯草芽孢杆菌。该芽孢杆菌在含有40Ftg／mL氯霉素的LB中培养后，菌液上清中可检测到目的蛋 白。Western blot结果显示，该蛋白能够特异性识别Asial型FMDV抗体。透射电镜观察显示，融 合蛋白组装为直径约50nra大小的病毒样颗粒(VLPs)。 将WB800表达的P14．VPl融合蛋白组装成的VLPs，与MONTANIDEISA206VG佐剂联合免 采血分离小鼠血清，用间接ELISA和病毒中和试验检测体液免疫效果。与对照组相比，接种融合蛋 白的小鼠能够产生ELISA抗体，但其血清无中和病毒的能力。 Asia 关键词： l型12蹄疫病毒；病毒样颗粒；融合蛋白 万方数据 Constructionofvirus-like vPlof particlesjo￡structural protein foot-and—mouthdiseasevirusandits immunogenicity Abs仃act all viral FMD(foot-and-mouthdisease，FMD)isacute，severe，highlycontagiousdisease，which causedFoot-and-mouthdisease virusisamemberofthe inthe by virus(FMDV)．The Aphthovirusfamily affectsanimalswi廿lclovenhoofed as Picornaviridae，which animals,such deer．Inadditiontothedirectcausethe reduces andmilk