家蚕micronas及其节律性表达.pdf

摘 ’挺 曼!曼皇曼皇曼．a i i—i [] ．a 一—— m_一ml一曼曼曼曼曼 家蚕microRNAs及其节律性表达 特种经济动物饲养专业博士研究生：刘仕平 指导教师：向仲怀院士 夏庆友教授 摘 要 单链小分子RNA。它们通过与靶基因mRNA的3端非翻译区互补作用对靶基因进行转录后调控。本论 候选基因，系统地总结了家蚕miRNA基因组分布规律和它们的分子特点。MiRNAs分布在基因组的多 个位点， 超过三分之二的miRNAs是位于基因间区，其余的分布在内含子或基因的外显子上。一些 miRNAs在家蚕中存在着旁系同源的多序列形式， 在基因组上还可形成“簇”。通过同源分析并经实验证实的miRNAs中。23条是广泛存在于无脊椎动物和 脊椎动物中，而另外19条只存在于昆虫纲的近源物种中。运用基因芯片和Northern杂交技术对首次 证实。通过对家蚕发育过程跟踪调查，揭示了它们在家蚕生活周期中的表达节律性， 发现了家蚕 小的前体。在幼蚕阶段，约三分之二的miRNAs，其表达水平随着眠期与龄期的更替而呈现出节律性 的变化。从家蚕～生来看，它们表达量与蜕皮激素滴度有比较一致的“波动”性。即使bmo—miR一34b 和bmo-miR-275有不同的表达模式，它们在蜕皮激素滴度变化的大多数“转折”点也有明显一致的 化蛹第3天却进入表达的低谷，从第4开始表达量急剧上升；在长达近9天的蛹变态过程中， lII 眄南人‘≯博I．．7’f?，论炙 bmo～mik一275达缮明显卜．调，而bmo—miR一29却逐渐上升， 表现…完全相反的变化趋势。有60条 mi RXAs以：蜕皮l衙后、吐丝前后、化蛹前后、化蛾前后、广．，：卵lii『后以及受精前后或升或降，有不同程 度的置异。通过对无龄3大雌雄家蚕的不同组织进行研究。揭示了miRNA的空间分布规律，发现了 miRNAs表达的性圳筹异和组织差异性。对凋亡中的丝腺、中肠等组织进行跟踪研究，揭示了miRNAs 台组织凋【=：嗣|车々化过程中的动态表达模式。通过对不同细胞系进行激素诱导，探索了miRNAs激素应 答规律。最后，通过对五龄3天的雌全蚕和雌蚕丝腺的小RNA进行测序。一共测出了347条miRNAs， 进一步确证了家蚕中miRNA分子大小，还找剑了近200条新的序列。结合实验结果，本论文还通过 挖掘人苗文献对家蚕发育变态、蜕皮、吐丝、化蛹、化蛾、受精、产卵、性别差异以及组织分化和 细胞凋亡等生物学现象的分子机制进行了深入分析，为洞悉家蚕发育变态、性别分化、组织凋亡等 生命现象的分子机制和深入研究miRNA的功能提供了新线索。 关键词：microRNA家蚕表达节律性蜕皮激素测序 IV S【’MMARY MicroRNAsof moriandtheir Bombyx ms expressionrhyth Liu Candidate：Shiping Supervisor：AcademicianZhonghuaiXiang Professor Xia Qingyou SUMMARY