小麦-非洲黑麦渗系的鉴定与抗条锈基因的分子作图.pdfVIP

摘要 摘要 非洲黑麦(Secale africanumStapf,R8基因组)是黑麦属的重要多年生物种， 但现在已处于濒临灭绝的边缘。非洲黑麦表现出矮杆和对多种病害具有抗性的优 异性状，因此对这一珍贵资源中优异基因的研究与开发具有重要意义。小麦条锈 病是我国小麦生产中最重要的病害之一，发掘小麦抗条锈病新抗源、明确抗条锈 病基因、进行可持续性抗病遗传育种研究，对我国小麦生产具有重要的意义。本 文从非洲黑麦特异标记的开发，小麦．非洲黑麦渐渗系的创制与鉴定以及渐渗系中 抗条锈病基因进行了研究，获得结果如下： 1．非洲黑麦新型重复序列的分离、染色体定位与应用。从非洲黑麦中分离得 为反转录转座子的部分序列。以这3个序列做为探针，用荧光原位杂交分析了它 除端部外的所有黑麦染色体臂上，而在小麦染色体上没有分布。pSaPl3662在黑麦 染色体上没有原位杂交信号。将这3个重复序列转化为SCAR标记(P13LF瓜、 P13SF／R和05F瓜)，通过对黑麦属物种、部分小麦族近缘物种及小麦．非洲黑麦的 渐渗系材料的PCR扩增检验发现，这3个新的SCAR标记能很好的用于黑麦染色 质的特异性检测。 2．小麦．非洲黑麦双二倍体的分子细胞遗传学鉴定。利用顺序染色体C带和基 因组原位杂交技术对安岳排灯麦．非洲黑麦双二倍体(AF)和波斯小麦．非洲黑麦 双二倍体(BF)进行分析，建立了非洲黑麦的标准C带图，发现非洲黑麦的染色体 和7Ra在长度和异染色质上明显少于栽培黑麦的4R和7R染色体。在对32株小麦一非 洲黑麦的双二倍体(BF)的细胞观察时发现，12株的细胞中存在非洲黑麦染色体 断裂，9株中存在非洲黑麦和小麦染色体的小片段易位；在16株AF后代中发现了3 株有非罗伯逊易位。结果说明在双二倍体中存在大量的小麦一非洲黑麦染色体重组， 这对进一步研究非洲黑麦-／J、麦远缘杂交具有重要意义。 摘要 材料含有黑麦染色质，并通过抗条锈观察筛选出了19株抗条锈病材料。利用非洲 黑麦基因组为探针，对这19株材料进行原位杂交，发现11株有杂交信号。结合染 色体C带分析发现：材料L1只携带一条1R8S／1BL易位染色体；L3携带一条黑麦染 色体小片段插入易位到小麦染色体上；L9．15携带了一对IR8S／1BL易位染色体；L16 中发现非洲黑麦染色体3R8与小麦染色体3BS的端部易位；L17为1Ra代换系。其他 抗条锈病材料利用GISH没有检测到杂交信号，这些不同类型的小麦．非洲黑麦异染 色体系材料可以用于转移非洲黑麦抗条锈病基因。 4．小麦．非洲黑麦衍生系材料L2中的抗条锈病基因分子作图。通过标记和近 等基因系的鉴定，L2中的抗条锈病基因为挣J7基因。对Yrl7基因进行了分子作 于EST的标记Xbcd348，其中标记SC-385与挣J7基因的距离为3．4cM，是至今最 近的挣J7基因连锁标记。对小麦中Yrl7基因区段与水稻基因组进行了比较分析， 建立了该区段与水稻的共线性关系，确定了y厂J7基因区段在水稻中的共线性区段， 为进一步利用BAC克隆开发新的标记来图位克隆Yrl7基因奠定了基础。 基因第2内含子序列发现，非洲黑麦和森林黑麦基因组中存在特异的MITE插入， 并根据此序列开发出非洲黑麦和森林黑麦染色体特异的分子标记。利用PDHAl基 因对小麦族进行了系统学分析，发现可以利用内含子多态性来研究种间的系统进 化关系。对PDHAl基因进行染色体定位，发现PDHAl基因位于小麦第二同源群、 效表达，为非洲黑麦中该基因的分离与应用提供了参考。 综上所述，本研究围绕非洲黑麦基因资源向栽培小麦导入的研究，开发了一 系列染色体组、染色体片段特异性分子标记，同时对育成小麦．非洲黑麦异染色体 系材料进行了分子细胞学鉴定，并对1份渐渗系中的抗条锈病基因进行了分子标记 分析，为进一步开展小麦染色体工程育种中利用非洲黑麦基因资源打下了基础。 关键词：非洲黑麦，渐渗系，分子作图，抗条锈病 II ABSTRACT all 3Pc口伦驴1c口咒删IS in S importants