广西猪prv分病原学调查及快速鉴别野毒感染双功能性分子的构建.pdf

广西大学硕士论文 广西猪PRV分子病原学调查及快速鉴别野毒感染双功能性分子的构建 广西猪PRV分子病原学调查及快速鉴别野毒感染 双功能性分子的构建 摘要 Virus，PRV) 引起的一种高度接触性传染病，给我国的养猪业造成巨大的经济损失。目前虽 法均需要特殊的仪器和有工作经验的人员进行操作，不适合基层生产单位使 用，因此迫切需要一种简便、快速的鉴别诊断方法。 基于国内广泛应用gE基因缺失苗进行免疫的现状，利用红细胞凝集试验 原表位基因融合，构建一种用于快速鉴别PRV野毒株感染的重组双功能分子， 建立一种利用红细胞凝集试验进行PR野毒感染的鉴别诊断方法。若该诊断方 法研制成功，将对该病的快速诊断具有重要的作用。 为了获得双功能性分子中PRV gE抗原肽，并摸清当前广西PRV的流行病 学情况和遗传变化规律，对来源于广西13个地(市)122个不同规模猪场163 ’ ，b 学检测玉林、南宁、桂林、贵港等8个规模猪场的61份血清，其中7份呈阳性， 广西地方株相应基因序列进行比较，结果显示6株毒株同国内毒株MinA株、 基酸同源性为96．5--一99．0％，与国外毒株Rice株核苷酸和氨基酸同源性最低， 广西大学硕士论文 广西猪PRV分子病原学调查及快速鉴别野毒感染双功能性分子的构建 密切，变异情况不大；调查显示PR的检出率并不高，说明我区PR的防控工作 已初见成效，但调查表明一些规模猪场仍存在PRV隐陛感染的情况，这提醒我 们PRV防控工作仍不能放松。 将筛查出的6份PRV[；D性样品进行病毒的分离工作，目前仅分离出一株 PRV病毒。该病毒接种家兔后引起典型的奇痒、神经症状，接种PK-15细胞出 段大小相符的带，与国内外不同PRV毒株进行分析比较，发现该毒株与其它5 实该分离毒为伪狂犬病病毒，命名为GXBB．1株。将该病毒株gE胞外基因作为 构建双功能分子的抗原肽部分进行试验。 PRV 链抗体基因2E8同GXBB PCR方法拼接起来，并回 gE胞外基因，利用SOE 收片段，同PMDl8一T simple 2E8一gE蛋白，从而建立PRV快速诊断试剂盒打下了基础。 关键词：伪狂犬病分子病原学红细胞凝集试验双功能分子 Ⅱ 广醋大学硕士论文 广西猪PRV分子病原学调查及快速鉴别野毒感染双功能性分子的构建 MOLECULARAETl0LOGINVESTIGATIONOF PORCINE IN PSEUDORABIASVIRUSGUANGXI ANDCONSTRUCTIONOFBIFUNCTl0NAL FORDISCRIMINATING MOLECULE WILD INFE(玎EDPIGS ABSTRACT Pseudorabieswhichcaused Virusoneof disease iS byPseudorabiesas diseaseshasmade losses．At therearePCRand contagious great present，though ELISAwhichd