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无冗余氨基酸鹅干扰素在毕赤酵母中的表达及其生物学活性研究
目 录
摘要………………………………………………………………………………………………………………………………………．I
英文摘要………………………………………………………………………………………………。Ⅲ
l前言…………………………………………………………………………………………………．．1
1．1干扰素概述………………………………………………………………………………………．1
1．1．1干扰素的产生和分类…………………………………………………………………………1
1．1．2干扰素的分子结构……………………………………………………………………………2
1．1．3干扰素的理化特性……………………………………………………………………………2
1．1．3干扰素的生物学活性…………………………………………………………………………2
1．2禽干扰素的研究概况……………………………………………………………………………．．3
1．2．1禽I型干扰素…………………………………………………………………………………3
1．2．2禽II型干扰素…………………………………………………………………………………4
1．2．3禽III型干扰素…………………………………………………………………………………4
1．2．4鹅小干扰素概述………………………………………………………………………………5
1．3酵母表达系统概述………………………………………………………………………………。5
1．3．1酵母表达系统的优点…………………………………………………………………………5
1．3．2两种酵母表达系统……………………………………………………………………………6
1．4本研究的目的与意义……………………………………………………………………………．．7
2材料与方法……………………………………………………………………………………………。8
2．1材料………………………………………………………………………………………………………………………………．8
2．1．1试验动物、禽胚、细胞………………………………………………………………………8
2．1．2质粒、载体、菌株、和毒株………………………………………………………………．．8
2．1．3引物设计与合成………………………………………………………………………………8
2．1．4主要试剂及抗体………………………………………………………………………………9
2．1．5主要仪器………………………………………………………………………………………9
2．2鹅。卜干扰素多克隆抗体的制备…………………………………………………………………．10
2．2．2大肠杆菌表达GolFN．Ct与纯化……………………………………………………………11
2．2．3 l
GoIFN．q多抗血清的制备及效价检测……………………………………………………．1
2．3鹅a．．干扰素在毕赤酵母中的分泌表达…………………………………………………………12
2．3．1鹅小干扰素原始基因的获得………………………………………………………………．12
15……………………………17
2．3．3重组表达载体pPICZo．A．GolFN吨的转化入毕赤酵母GSl
9
2．3．5鹅口干扰素在毕赤酵母中的表达…………………………………………………………19
I
东北农业大学农学硕士学位论文
2．4高密度发酵工艺的初步研究……………………………………………………………………21
2．4．1种子液的制备………………………………………………………………………………21
2．4．2发酵罐的组装与灭菌………………………………………………………………………2l
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