苦豆籽粕-两歧歧杆菌-唾液乳杆菌合生元微胶囊的研制.pdfVIP

摘 要 为了研发安全、高效、绿色的合生元用于仔猪早期断奶应激综合征的防控，本 试验以抑制仔猪致病性大肠杆菌效果优异的猪源唾液乳杆菌 (Lactobacillus salivarius)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)为益生菌和苦豆籽粕为益生 素，通过海藻酸钠-壳聚糖包被技术将其制成合生元微胶囊进行了一系列探讨。 试验分 4 步进行： 1.抑制仔猪致病性大肠杆菌效果优异菌株的分离。采集不同日龄的健康仔猪新鲜 粪便，经过分离、纯化和牛津杯法筛选得到抑制仔猪致病性大肠杆菌效果优异的菌株。 2.筛选菌株特性研究。分离菌株利用生化鉴定和 16S rDNA 序列同源性分析进行 菌株鉴定，然后进行生物学特性试验研究，最后与文献中报道的抑制致病性大肠杆菌 优良的一株猪直肠分离的嗜酸乳杆菌标准菌株进行抑菌对比。 3.合生元微胶囊配方的确立。通过试验寻找合生元微胶囊制作的益生菌、益生素 比例及保护剂、氯化钙、壁材浓度。 4.合生元的制作。采用 3 种制作工艺制备苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合 生元微胶囊，并进行贮存稳定性等内容的比较研究。 结果显示： 1.在 TPY 和 MRS 培养基厌氧条件下从健康仔猪新鲜粪便中分离得到了 35 株疑似 # # 乳酸菌，在此基础上利用牛津杯法从中又筛选出抑菌效果最好的 11 和 14 菌株。 # # 2.11 和 14 菌株，经生化鉴定和分子生物学鉴定，符合唾液乳杆菌的特性。综合 # # 牛津杯法和生物学特性试验，最终选择 14 菌株用于制备合生元。14 菌株抑菌效果远 远强于文献中报道的抑制致病性大肠杆菌优良的一株猪直肠分离的嗜酸乳杆菌标准 菌株。 3.通过对几种常用微胶囊化方法筛选表明，挤压法包被两歧双歧杆菌和唾液乳杆 菌效果较好。其最佳配方为：菌（唾液乳杆菌与两歧双歧杆菌的活菌比例为 10: 1） 胶比为 2：1；4％脱脂乳、1％L-谷氨酸钠溶液、2％海藻酸钠、0.5％壳聚糖、2.5％ CaCl 和 6％苦豆籽粕。 2 9 8 4.工艺 1和工艺 3制备的产品活菌数分别达到1.1×10 Cfu/g 和 2.0×10 Cfu/g， 8 7 人工胃液和人工肠液处理后的活菌数分别为 2.5×10 Cfu/g 和 4.3×10 Cfu/g，常 7 8 温保存 90d 后活菌数分别为 3.7×10 Cfu/g 和 1.6×10 /g。由此可见，工艺 1 和工 艺 3 制备的苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元微胶囊活菌数高，便于常温贮 存，保质期长，而且具有耐胃酸性、肠溶胃不溶的特性。 结论： # # 1.从健康仔猪新鲜粪便中分离得到抑制致病性大肠杆菌效果最好的 11 和 14 菌 株，经试验鉴定均为唾液乳杆菌。 2.采用挤压法制备的合生元微胶囊的最佳配方为：菌（唾液乳杆菌与两歧双歧杆 菌的活菌比例为 10: 1）胶比为 2：1；4％脱脂乳、1％L-谷氨酸钠溶液、2％海藻酸 钠、0.5％壳聚糖、2.5％CaCl 和 6％苦豆籽粕。 2 3.工艺 1和工艺 3制备的苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元微胶囊生产 工艺简捷，性能稳定，在工业化生产，商品运输、贮藏和临床应用等诸多方面具备一 定的优势。 关键词：苦豆籽粕；两歧双歧杆菌；猪源唾液乳杆菌；合生元微胶囊；仔猪早期断奶 Development of foxtail-like sophara s