与内质网应激相microrna的筛选及其靶标的验证.pdfVIP

与内质网应激相关microRNA的筛选及其靶标的验证 摘 要 真核细胞中大约三分之一的蛋白质进入内质网中完成折叠和一些加工过程。当 进入内质网中的蛋白质超过了内质网功能的承载能力，就会激活未折叠蛋白质反应 (unfolded protein 进入内质网的蛋白质量。内质网应激和许多疾病状态相关，如代谢性疾病、心血管 疾病和神经衰退性疾病。 种细胞应激反应，其中的一些应激反应也影响到内质网的功能，如缺氧、胰岛素分 步探讨这些MicroRNA在内质网应激中的生物学功能。进行了以下研究： 1．基因芯片筛选与内质网应激相关mieroRNA 变化，其中miR．26a表达量下调，miR．148a，miR-181b和miR．30d表达量上调，但变 化的幅度都不大。 2．建立实时定量RT-PCR检测mieroRNA的方法，验证基因芯片结果 上调程度和内质网应激的程度正相关。 3．miR．148a调控UPR相关基因PDIA3和CNX CNX报告质粒的相对荧光值。构建PDIA3 变的报告质粒，共转染实验证实突变后消除了miR．148a模拟物的抑制作用。说明 miR-148a调控UPR相关基因PDIA3和CNX。 4．miR-148a、PDIA3和CNX在内质网应激过程中的变化关系 ———————————————————————__-__-___-—_●-I——____—____—————————————————————一一 一．一堡主奎些奎堂!旦!三旦堡主堂焦笙茎—— 量变化，绘制表达量的动力学曲线。结果显示在内质网应激过程中，3种基因的表达 与miR-148a的变化幅度相近。 关键词：内质网应激；miR-148a；PDIA3；CNX 2 与内质网应激相关microRNA的筛选及其靶标的验证 Abstract onethirdof in cellsenter reticulum Approximatelyproteinseukaryotic Endoplasmic lumento their and some completefoldingprocessundergoposttranslational If exceedsthe and／or theinfluxof nascent，unfolded folding processing polypeptides ofthe normal stateoftheERis capacityER，the physiological theunfolded activatedto thebalance adjust pathways，termedproteinresponse(UPR)，are betweenthe and of andER fidelityproteinfolding protein efficiency withthe ofnumerousdisease reticulum Stress)related states， stress(ER etiology metabolic