福氏志贺氏菌m0t毒力相关膜蛋白复合物组成蛋白基因缺失突变体的构建.pdfVIP

摘 要 志贺氏菌是引起人类腹泻病常见的病原菌之一，严重影响人们的日常生活，重 症者致死。目前由于人们对志贺氏菌的致病机制和宿主的免疫保护机制还不十分清 楚，还未研究出非常有效的疫苗，无法有效控制传染。 细菌膜蛋白复合物在细菌致病的过程中发挥着重要的作用，而毒力大质粒是志 贺氏菌致病的关键，毒力大质粒丢失后志贺氏菌失去致病性，那么野生株和毒力大 质粒缺失株的膜蛋白复合物是否存在差异，如果存在差异，差异之处的膜蛋白复合 物是否参与志贺氏菌的致病过程或影响志贺氏菌的毒力？本实验室以此为出发点通 过BN PAGE，分离了志贺氏菌福氏5型M90T野生株和M90T毒力大质粒缺失株膜蛋白复 合物谱，通过比较观察，发现在分子量约290 kDa处有一条野生株特有的条带，此条 带经质谱鉴定后，包含由毒力大质粒编码的Apyrase和染色体编码的DnaK、ClpB、 GapA、EF-Tu、YdgA 6个蛋白质组成。经文献调研，其中Apyrase和DnaK均能影响外 膜蛋白IcsA的极性分布和功能，减弱了志贺氏菌的毒力。综合分析，我们推测此复 合物的各个蛋白可能共同调节外膜蛋白IcsA的极性分布和功能。 为验证我们的推测，本实验采用由Datsenko和Wanner建立的 λRed重组系统